观察斑马鱼的作文
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/12 12:56:15 优秀作文
篇一:斑马鱼实验报告
斑马鱼实验预习报告
一、 实验目的
1、 了解斑马鱼形态结构特点
2、 掌握斑马鱼的分类地位
3、 掌握斑马鱼胚胎发育过程并探究其胚胎发育的影响因素
二、 实验内容
1、 斑马鱼的外部形态观察
2、 写出斑马鱼的分类地位
3、 设计实验探究斑马鱼胚胎发育的影响因素
三、 实验操作
1、 观察斑马鱼的形态
斑马鱼(zebra fish),又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼(Brachydanio rerio),原产于印度、孟加拉国。 斑马鱼(B. rerio),是淡水水族箱观赏鱼,原产於亚洲,体长约4公分(1.5吋),具暗蓝与银色纵条纹。
体长4~6厘米。体呈纺锤形。背部橄榄色,体侧从鳃盖后直伸到尾未有数条银蓝色纵纹,臀鳍部也有与体色相似的纵纹,尾鳍长而呈叉形。雄鱼柠檬色纵纹;雌鱼的 蓝色纵纹加银灰色纵纹。
2、 斑马鱼的分类地位
动物界
脊索动物门
脊椎动物亚门
硬骨鱼纲
辐鳍亚纲 真骨鱼总目
鲤科
短担尼鱼属
3、 设计实验
斑马鱼的胚胎发育经过受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、胚层分化及出膜几个时期。
实验猜想:影响斑马鱼胚胎发育的因素有水温、营养成分、氧气等
实验方法:控制变量法(探究其他条件相同时,不同温度对斑马鱼胚胎发育的影响)
参考:
http://nc.mofcom.gov.cn/news/P1P44I6045195.html
篇二:斑马鱼的繁殖与胚胎观察
斑马鱼的繁殖与胚胎观察
一、实验目的
学会根据实验目的查阅相关文献和资料,独立设计实验方案并完成实验操作、数据记录和结果总结全过程。
二、实验原理
斑马鱼为小型热带鱼,成鱼体长4公分左右,鱼体分布有头尾方向的蓝色条纹。斑马鱼的饲养对水质要求不高,孵出后约3天达到性成熟,成熟鱼每隔几天可产卵一次。卵子体外受精,体外发育,胚胎发育同步且速度快,胚体透明。发育温度要求在25-31℃之间。斑马鱼的繁殖周期约7天左右,受精卵经2-3天可孵出仔鱼,一年可连续繁殖6-7次,而且产卵量高。
三、实验内容
1、斑马鱼的人工繁殖观察
2、斑马鱼胚胎发育观察
四、器材材料
饲养箱 鱼箱 恒温培养箱 电子显微镜 饲料 细网
五、实验步骤
1、 亲鱼的选取与喂养
从水产基地里挑选15到20尾亲鱼,并根据皮肤、外形等使选出的雌雄比例接近1.5:1,并分开放入饲养箱中,饲喂3~4天。饲喂饲料为活性饲料与配合饲料结合,每天饲喂2~3次。 2 、亲鱼的受精与孵化
4天后,将所选出的雌雄亲鱼一并放入同一鱼箱中,控制水温25~28℃。为防止亲鱼吞噬鱼卵,可用网孔2~3mm的网将亲鱼限制在产卵池的上半部活动。将受精结束后获得的受精卵捞出,剔除异物,将眼观有白色小斑点、畸形异常卵去除。然后将受精卵移入培养箱中进行孵化,温度为25~28℃,温差不能够超过0.5℃。
3、 胚胎发育的观察
斑马鱼的胚胎发育分为7个阶段:合子期、分裂期、囊胚期、原肠胚期、体节期、咽囊期、孵化期。
合子期:合子是一个包括卵黄和细胞质的半透明混合物,在动物极存在一个小的清晰的细胞质断层,即细胞泡的残余。
卵裂期:该时期的特点是细胞分裂间期短;细胞变小;不等裂。斑马鱼的受精卵为端黄卵,卵裂局限于胚盘部分,为不完全卵裂。斑马鱼受精后40分左右卵裂开始,平均约每隔15分卵裂一次。
囊胚期:从第八次卵裂开始,就进入囊胚期 ,与其他真骨鱼不同的是,斑马鱼的囊胚期不形成囊胚期腔,只在胚盘的下层细胞的一些小的细胞形成一些细胞外间隙;同时细胞分裂周期开始延长,标志着中胚囊转换开始。
原肠胚期:原肠作用是指囊胚细胞有规则的移动,在此时期斑马鱼的生殖层开始形成,斑马鱼的原肠运动主要为外包。
体节期:最显著的特征是近轴中胚层节律性分节形成体节。此外,还有眼原基和耳原基开始出现:脑神经外胚层变厚;脊索细胞开始延展到胚胎尾部。
咽囊期:体轴从原来的弯曲变为伸直;鳍条开始发育 孵化期:完成基本器官系统的快速形态发生。
合子期 卵裂期 囊胚期
原肠胚期 体节期
咽囊期 孵化期
六、实验思考
斑马鱼容易饲养、取材,胚胎发育各时期特征明显,易于分辨观察、发育时间在温度恒定情况下较稳定,便于收集特定发育时期的胚胎材料,是研究胚胎发育的优良材料。
由于斑马鱼卵为端黄卵 ,其早期胚胎含有较多的卵黄 ,且原生质部分与卵黄在制片过程中收缩程度不同 ,故制片过程中常出现卵黄破裂现象 ,应在脱水过程中减小梯度酒精的跨度 , 以减轻该现象发生.
篇三:人教版四年级上册二单元作文:我的发现
人教版四年级上册二单元作文:我的发现
在我家养着一缸海鱼。在灯光的照耀下,美丽的珊瑚在水中飘来飘去,犹如一位姑娘在舞蹈。凶猛的黑豹鱼、可爱的斑马鱼调皮的番茄鱼多得数不清。
这天,当我准备给鱼儿喂食的时候,我发现斑马鱼整个身子都浮在水上。我想:这条斑马鱼怎么会浮在水上呢?我还是先观察几天吧!
第二天一早,我跑到海鱼缸旁边,看到斑马鱼和番茄鱼在玩耍。我看到后,把今天的事情记录在本子上。晚上,我发现斑马鱼整个身子一动不动地浮在水面。这是怎么回事?难道它晚上死了,第二天又复生?唉,等我多观察几天再说吧!于是,我又把看到的现象记了下来。接下来一连几天里,我把看到的都记在本子上。
一天,我终于忍不住了,问爸爸:这条斑马鱼怎么会每天晚上整个身子都浮在水面上一动不动呢?是有意装死吓唬人吗?爸爸听了后,笑了笑,对我说:这个是斑马鱼的习惯,它每天都会浮在水面上的!我听了以后,说:原来是这样,我还以为斑马鱼有起死回生的本领呢!!爸爸摸着我的小脑袋赞扬道:你真是一个仔细观察的好孩子!要多学一些东西,就一定要自己去观察,自己去发现。我兴奋地说:爸爸,这也算是我的发现吧?看着爸爸不住地点着头,我的心比吃了蜜糖还甜。
篇四:模式动物斑马鱼
模式动物斑马鱼
斑马鱼(Danio rerio)属于辐鳍亚纲(Actinopterygii)鲤科(Cyprinidae)短担尼鱼属(Danio)的一种硬骨鱼,原产于南亚,是一种常见的热带观赏鱼,因其体侧具有斑马一样暗蓝与银色相间的纹条而得名。
斑马鱼个体小,易于饲养,成体长4-5cm,雄鱼体修长,雌鱼体肥大。可在有限空间里养殖相当大的群体,可满足样本需求量大的研究。斑马鱼发育迅速,在28.5℃培养条件下受精后约40min完成第一次有丝分裂,之后大约每隔15min分裂一次,24h后主要器官原基形成,相当于28d的人类胚胎,幼鱼孵出后约3个月达到性成熟。雌雄鱼通过调控光周期控制14:10(光照:黑暗)产卵时间,成熟鱼每周可产卵一次,一尾雌鱼每次可产卵100-300枚。胚胎体外受精,体外发育,胚体透明,易于观察。受精卵直径约1mm,易于进行显微注射和细胞移植等操作。
一、斑马鱼的品系
经过30多年的研究应用和系统发展,已有约20个斑马鱼品系,斑马鱼基因数据库-ZFIN(http://zfin/org)里有相关的资料可供查询和下载。目前研究中常用的斑马鱼野生型品系主要为AB 品系、Tuebingen(Tu)品系、WIK 品系,斑马鱼基因组计划所用品系是Tu。AB品系是实验室常用的斑马鱼品系,由单倍体细胞经早期加压法获得。Tu品系斑马鱼具有胚胎致死突变基因,用于基因组测序前敲除该致死突变基因。WIK品系较Tu品系具有更多的形态多样性。此外,还保存有3000多个突变品系和100多个转基因品系。这些品系资源对于利用斑马鱼开展各种科学研究起着很大的推动作用。
二、斑马鱼突变品系的筛选
斑马鱼突变的方法主要有三种:已基亚硝脲(ENU)化学诱导、γ或χ射线照射和插入诱变。ENU是一种DNA烃基化试剂,在生殖细胞减数分裂前诱导碱基对的替换,诱导产生的突变率为0.1%-0.2%,涉及单个基因的突变。射线照射导致染色体大片段的缺失或染色体重排,产生突变率达1%。插入诱变是以逆转录病毒为载体,用显微注射法将目的基因片段导入斑马鱼受精卵,整合到基因组中,干扰正常基因表达。射线照射产生的突变率是ENU化学诱导的10倍,但由于突变涉及多个基因,突变的表型是受若干基因调控的结果,不利于基因功能的分析,因此,ENU化学诱导法是斑马鱼突变的主要方法。研究含有纯合致死
基因或隐形突变基因的突变表型时,可通过早期加压法(EP)处理母本获得的单倍体卵细胞获得二倍体纯合子。
三、斑马鱼作为人类疾病动物模型的生物学特性
斑马鱼在基因水平上87%与人类同源,早期发育与人类极为相似,已成为研究相关疾病基因的最佳模式生物。筛选斑马鱼胚胎或成鱼基因库中类似于人类致病或特定功能的基因,构建进斑马鱼受精卵中,观察特定基因在斑马鱼胚胎发育过程所起作用。斑马鱼胚胎发育是全透明的,可以全程观察并研究其发育状况。目前,斑马鱼模式生物的使用正逐渐拓展和深入生命体的多种系统(例如,神经系统、心血管系统、免疫系统等)的发育、功能和疾病(例如,神经退行性疾病、心血管疾病、免疫系统疾病等)的研究中,并已用于小分子化合物的规模新药筛选。
3.1神经系统模型
斑马鱼研究表明,神经特异性钠离子通道大量表现在中枢和周边感觉神经系统,有效调控神经的兴奋性,其基因表达调控及信号通路是神经学研究重点。
阿尔茨海默氏病(AD)是一种由于大脑神经细胞死亡而造成的神经退行性疾病。AD与淀粉样蛋白(Aβ)的过量表达沉积有关,Aβ是由APP连续切割产生,而早老素增强子(pen-2)和前咽陷子(Aph-1)参与Aβ的产生。研究表明,将斑马鱼相关基因的表达进行敲除,发现Pen-2与P53依赖型神经细胞的存活有重要作用。并且在构建绿色荧光蛋白(GFP)转基因斑马鱼品系中,发现在2-3月龄转基因斑马鱼大脑中,广泛大量表达GFP-APP。这些说明斑马鱼神经系统发育在进化上和人类的保守关系。
帕金森氏病(PD)与多巴胺能(DA)通路的破坏有关。神经毒物MPTP对人类中脑多巴胺能神经细胞的损伤现象与PD类似。研究者将多巴胺转运蛋白抑制物和MPTP共同作用于斑马鱼幼鱼,发现这些药物具有保护多巴胺能神经细胞的作用。
3.2心血管系统模型
斑马鱼胚胎期和幼鱼期为透明体,这为心血管发育的研究提供了良好模型。研究发现,斑马鱼的心脏受损后具有自动修复功能,这是首次发现脊椎动物的心脏具有再生功能,为探寻人类心脏受损修复带来希望。斑马鱼突变品系可作为研究心脏节律、心脏管形成、瓣膜发生和心脏环化的模型。例如,突变品系gridlock(gdl)可用于研究人类主动脉缩窄疾病。克隆与斑马鱼同源的人类载脂蛋白基因apoE和apoA-1,发现这些蛋白对哺乳动物脂质的吸收和分布具有重要作用,而Apo-1在AD治疗中也有重要作用。胚胎注射血管内皮因子(VEGF)
的斑马鱼在发育过程中可以观察到明显的新生血管,而肿瘤的发生与转移又与血管新生有密切关系,这启发人们通过阻断VEGF抑制血管增生而治疗肿瘤。
3.3免疫疾病模型和感染疾病模型
斑马鱼具有较完整的特异性免疫系统,体内的T淋巴细胞和B淋巴细胞具有免疫活性,非特异性免疫系统也呈现出与人类的相似性,同时保留了TLR信号通道。成鱼体内注射细菌和胚胎浸没感染法可使斑马鱼感染细菌,有效建立相应的细菌发病机理研究模型。海分枝杆菌感染的斑马鱼体内的肺结核肉芽肿和人类一样出现干酪样坏死,该模型可能在肺结核研究中发挥重要作用。
3.4肿瘤模型
肿瘤是造成人类死亡的主要原因之一,斑马鱼可以自发产生肿瘤,并且许多肿瘤与人类肿瘤非常相似,因此,斑马鱼作为最有前途且最廉价的模式生物而被广泛的应用。肿瘤模型的构建主要是通过移植术、化学诱变和基因突变获得。移植术即直接将肿瘤细胞注射到不同发育阶段的斑马鱼的特定部位,或者将含有GFP表达基因的肿瘤细胞显微注射到斑马鱼胚胎或幼鱼中。化学诱变可以快速获得斑马鱼肿瘤模型,例如,诱变剂处理斑马鱼胚胎或幼鱼可以获得肝癌、血管瘤、细胞间质瘤等。但是化学诱变会引起非特异性表型,而且肿瘤定位困难。基因突变则是将含有GFP报告基因的肿瘤基因通过质粒转导到斑马鱼体中,可用以进一步鉴定肿瘤发生的分子机制。
3.5视网膜自动修复机能
斑马鱼研究发现,斑马鱼视网膜具有可再生放射状胶质细胞,这些细胞可分化为健康的视网膜细胞,并能自动修复受损视网膜。人类视网膜拥有类似斑马鱼的放射状胶质细胞,但是这些细胞无活性。研究人员已成功将放射状角质细胞分化的视网膜细胞移植到老鼠上,这为激活人类放射状胶质细胞的研究奠定了重要的基础。
四、斑马鱼在发育遗传学中的应用
斑马鱼作为发育生物学模式生物有很多优势,胚胎清透可见,从受精卵发育到完整的胚胎形成只需24h,发育过程便于观察。GFP转基因技术的运用可对特定组织进行实时观察。可对批量样本进行免疫组化或荧光免疫研究。可对胚胎进行显微注射DNA或RNA,影响基因表达。
吗啉代(morpholino)基因敲除技术和异位基因表达技术是目前斑马鱼发育遗传学研究中的新兴技术。2000年,有研究者提出注射吗啉代修饰性寡聚核苷酸可产生基因敲除斑马
鱼。吗啉代有抑制翻译起始,减少传统反义寡聚核苷酸非特异性的效应。注射吗啉代能产生以往证实的基因突变的拟表型,有助于确定功能基因。吗啉代寡核苷酸正成为快速、高效的基因敲除方法。对越早期胚胎注射外源基因,基因表达范围就越广,异位基因表达技术就是为使基因在斑马鱼特定细胞、组织和特定时间表达而建立的一系列新技术。如RNA caging技术,RNA与RNA caging共价结合时处于非活性状态,经特定波长照射,RNA caging被破坏,激活RNA,基因得以表达。同样,激光诱导基因表达技术即外源基因与热休克蛋白启动子重组,激光热敏效应启动基因表达。
五、斑马鱼在生态毒理学中的应用
斑马鱼模型最早用于发育生物学和遗传学研究,近几年,斑马鱼模型逐渐应用于生态毒理研究和检测技术。
5.1常规毒性实验中的应用
斑马鱼模型可用于急性毒性实验、慢性毒性实验,以及蓄积毒性实验。斑马鱼急性毒性实验用于检测各种农药、有机试剂和污染物等的急性毒性。斑马鱼胚胎比成年斑马鱼敏感,对于急性毒性方面是一个很好研究模型,可于显微镜下观察胚胎发育的生态毒理学终点。慢性毒性实验测定低浓度污染物在斑马鱼生活周期内的毒性作用,来确定化学物质最大容许浓度及其影响程度。通过慢性毒性实验可观察同种鱼在不同发育阶段(发育代)对化学物质的毒性差异。蓄积实验则检测外来化学物质在机体内蓄积或富集性大小的实验。
5.2分子及细胞生态毒理中的应用
化学物质进入生物体后,对生物产生不同程度的危害。生物在受到损伤或致死前,其行为、生理、生化已发生反应,可以选择这些在分子和细胞水平上的指标测定化学物质对生物的影响。例如,在斑马鱼胚胎发育晚期,硫代硫酸钠可刺激胚胎细胞的大量异常增殖,这些异常细胞会引起胚胎的部分器官发育畸形。可通过胚胎、软骨组织染色,或全组织包埋原位杂交等技术进行显微观察。
5.3水质检测中的应用
运用转基因斑马鱼的某些效用元件来显示其接触的特定污染物可检测水质的变化。例如,斑马鱼可检测水环境中雌激素污染,当水样中存在一定浓度的雌激素时,会发现斑马鱼发育过程中出现性别的干扰和反转现象。而转基因斑马鱼DNA具有环境污染物的效应元件,效应元件结合报告基因,例如GFP,当水体中含有待检测环境污染物时,基因被激活并与报告基因共同表达,使鱼体呈现荧光。
六、展望
斑马鱼作为人类疾病研究模型、发育遗传学研究模型和生态毒理学研究模型在人类健康、医学和环境保护等领域发挥重要作用。斑马转基因技术对分析细胞间相互作用,作为动物模型探讨发育、生长、繁殖等机理,以及阐明控制脊椎动物的发育机制等方面具有重要意义。
篇五:斑马鱼
新型模式动物斑马鱼在分子生物学和医学中的应用举例
摘要:斑马鱼由于其独特的生物学特性作为一种新型的模式动物在医学、分子生物学、发育生物学、环境监测和毒性检测等方面在国内外得到了广泛的应用。本文概述了其在分子生物学和医学中的具体应用两例,展示了其在实验动物学中诱人的发展前景。
关键词:斑马鱼、模式动物
斑马鱼(又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼,Brachydanio rerio),鲤科,原产自印度、孟加拉国。体长为4-6cm。雌雄鉴别较容易,雄鱼的蓝色条纹偏黄,间以柠檬色条纹;雌鱼的蓝色条绞偏蓝而鲜艳,间以银灰色条纹,身体比雄鱼丰满粗壮,各鳍均比雄鱼短小。饲养容易,对水质要求不严,水质为中性,水温以22~26℃为宜。耐热性和耐寒性都很强,可在10℃以上的水中很好地生长,属低温低氧鱼。可与其他小型鱼混养,对食物不挑剔,各种动物性饲料,干饲料均可,很少患病。繁殖比较容易,繁殖水温以24℃为宜。每尾雌鱼每次产卵约300余粒,体型较大者有时可产上千粒。卵子体外受精,体外发育,胚胎发育同步且速度快,胚体透明。受精卵约经36h孵化,两天后仔鱼卵黄囊消失,可游动摄食。发育温度要求在25-31℃。幼鱼三个月可达性成熟。斑马鱼凭借自身优势,已成为理想的脊椎动物模型。
[1]实例一:“绿色”胰岛β细胞发育转基因斑马鱼模型。第一: 克隆表达载体, 挑选酶
切鉴定后阳性的克隆作注射准备。第二:显微注射,即让外源性DNA片段进入斑马鱼基因组。第三:生殖系转基因系的筛选和建立,即蔡斯体视荧光显微镜下筛选胰岛位置特异性表达绿色荧光蛋白(GFP)的胚胎.建立生殖系稳定遗传的Fl代胰岛β细胞转基因斑马鱼系。第四:应用PCR和WISH证实为转基因斑马鱼系。第五:形态学观察,荧光显微镜下观察荧光标记并拍摄得到荧光标记物于胚胎侧面和背面的整体分布图。第六:应用化学遗传学方法破坏斑马鱼胰岛β细胞,模型建立。斑马鱼的应用为高通量筛选具有胰岛β细胞保护和再生作用的药物(包括中药、草药、小分子化台物等)提供了理想的动物疾病模型,为糖尿病这一核心病机的治疗带来了机会。
[2]实例二:flk—GFP斑马鱼模型,它是研究抗血管生成药物的理想动物模型。方法如下:
成年flk一GFP转基因斑马鱼交配,产卵,待分裂至16—256细胞期时,将鱼卵随机置于96孔培养板(U底)中。实验组,每孔载入3个胚胎及鱼水(速溶海盐40 g加蒸镏水1000 mL)200μl,于4 hpf(hourpost fenilized,受精后小时数)时,自化合物库中加样,使加药后终浓度为
-110μmol·L;28℃培养箱中,培养至24
hpf;于倒置荧光显微镜下,观察flk—GFP转基因斑马鱼的血管生成情况。于同一培养板中,留出一列孔,不予加药,作为对照组。近年来随着肿瘤发病机制研究的不断深入,分子靶向药物的研究成为肿瘤治疗学研究的热点之一。血管生成抑制剂就是其中一类。斑马鱼通过血管芽的发育形成血管,与哺乳动物的血管形成途径需要相同的生物活性物质。flk—GFP转基因斑马鱼是一种在血管内皮细胞表面表达GFP的转基因动物,研究者可以在多孔板中观察斑马鱼胚胎的血管生成发育过程,从而能直接快速地筛选出影响血管形成过程和形状的化合物。因而,flk—GFP斑马鱼已成为研究血管生成独特的模式生物。
斑马鱼不仅在分子生物学和医学中得到广泛应用,在发育生物学、遗传学、毒性评价、
[3]胚胎毒性技术中都有应用。如由于斑马鱼胚胎发育迅速、具有透光性,各器官正处于发育
形成阶段,对水质污染和受压状态非常敏感,可用来监测水质的细微变化;能耐受的氧含量范围宽,所需溶液少,尤其适用于代谢物的检测;胚胎的急性毒性实验与成鱼具有很好的相关性,完全可以替代成鱼用于急性毒性检测;OECD也将斑马鱼胚胎检测技术列为测定和评价化学品毒性,尤其是致畸性的标准方法,并制定了详细的操作指南(OECDTG212)。此外,斑马鱼已经作为人类疾病研究模型,而且也被认为是人类基因组计划中功能染色体组研究的理想模型。以上综述可见,斑马鱼的发展前景是十分诱人的,它将在更宽广的领域得到更深入
的研究与应用。
参考文献
1. 夏铭;潘雪;李珊珊;孔德明;邓敏 “绿色"胰岛13细胞发育转基因斑马鱼模型及应用
2. 吴新荣;仲寒冰;袁进;李晋;罗新根;林硕 麦考酚酸对flk—GFP斑马鱼模型抗血管
生成的作用机制研究[期刊论文]- 中国临床药理学杂志2008(6)
3. 耿波; 曹顶臣;孙效文; 欧阳红生 斑马鱼一新型的实验动物[期刊论文]-水产学杂志
2006(11)
优秀作文