有没有人反向PCR以后,连到载体上,测序发现：只有引物正确,其它的都不是目的序列就是说反向PCR后,扩增出来的序列本应该是有酶切位点的,结果测序结果显示没有那个酶切位点,但是却有引物

有没有人反向PCR以后,连到载体上,测序发现：只有引物正确,其它的都不是目的序列就是说反向PCR后,扩增出来的序列本应该是有酶切位点的,结果测序结果显示没有那个酶切位点,但是却有引物 有没有人反向PCR以后,连到载体上,测序发现：只有引物正确,其它的都不是目的序列就是说反向PCR后,扩增出来的序列本应该是有酶切位点的,结果测序结果显示没有那个酶切位点,但是却有引物 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k 具有3'到5‘外切活性DNA聚合酶的PCR产物不能用末端加A尾活性连到T载体上吗 进行PCR扩增时为什么要将目的基因连到载体上?直接对其进行扩增不行吗?如题!如果比加载体可以不用加引物,直接用水补充不可以吗? 由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引 催化剂是怎么连到载体上的 序列连在T载体上,用sacⅡ单酶切之后目的条带没有了（t载体有）,这是咋回事啊序列两端都是sacⅡ酶切位点 苯环上连一个CH2-OH叫什么RT,不知道深夜有没有人OTL cDNA连到表达载体上也可以将表达载体转化农杆菌进行复制和保存啊 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 用菌斑跑PCR有目的条带,用菌液怎么就跑不出?我用农杆菌菌斑稀释后跑PCR,电泳有目的条带,提质粒也有,为什么用菌液就跑不出呢?与目的基因连在同一载体上的筛选基因用菌液跑却每次都能跑 PCR的产物3末端有A 而T载体的3末端有T.都是3末端,怎么连接上呢? 从克隆载体上PCR出目的基因原理 哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?现在需要连T,但是Pcr引物两端加了SacI和BamHI这两个酶切位点,所以需要找一个合适的T载体. 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体?