请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,酶切体系

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/05 11:33:35

请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,酶切体系
请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,酶切体系

请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,酶切体系
这个文献有详细步骤
For the combination EcoR1/Mse1,genomic DNA (75 ng) was incubated for 2 h at 37 °C with 1.25 U of Mse1,1.25 U of EcoR1,1 U of T4 DNA ligase,40 pmol of Mse1 adapters and 10 pmol EcoR1 adapters.This reaction was done in a volume of 50 µl of restrictionñligase buffer containing 10 mM Tris-HCl (pH 7.4),50 mM NaCl,1 mM dithriothreitol (DTT),0.1 mM EDTA,50 % (v/v) glycerol,0.15 % (v/v) Triton X-100 and 200 ng/µl BSA.The reaction was terminated by heating at 70 ˚C for 15 min,and then placed on ice.

请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,酶切体系 AFLP酶切问题请问做AFLP,用EcoR1与Mse1做双酶切,有酶切过度这一说吗?就是说酶切时间超长,酶的用量超多,会不会酶切过度,把基因组DNA切的小片段很多? AFLP选扩2%琼脂糖检测没条带,呈现全带弥散,有此经历的帮下忙,用的内切酶是Ecor1 跟Mse1 做DNA的AFLP实验为什么用PAGE变性胶啊? AFLP选择性扩增 这是怎么回事啊!预扩增已经看到片段在1000bp以下有所富集,可是在预扩引物3‘端加上选择性碱基后,怎么显得扩增到1000bp以上去了!还有,大家的ECOR1和MSE1的接头序列可不可以发 AFLP® Analysis System I能用来做蚯蚓的基因组吗?请问 有哪位童鞋做过AFLP?我看到invitrogen的试剂盒,说适用于植物的基因组,从原理上来说,我能拿这个试剂盒做蚯蚓的基因组吗?蚯蚓基因组大约是 做AFLP酶切连接产物稀释多少倍作为预扩增模板合适呢? 我做AFLP预扩,总是没有东西,没有smear现象,什么都没有,不知哪出错了? AFLP分析都要分析哪些项目小弟现在AFLP试验已完,条带也已统计,请问各位大侠,AFLP结果分析都要分析哪些项目,大概怎么分析.用什么软件分析的好,我看大家分析基本山都用popgen,ntsys,spss等. 生化实验做了质粒DNA的双酶切,实验用的是BamH1 和EcoR1 .实验老师课上还讲了结果.但是不让拷ppt.我们做出来的图好像有三条带子.想知道那三条分别是什么?有一个700多bp, AFLP选择性碱基为什么使用三个而不是用四个 AFLP预扩产物有点大,选择性扩增后从点样孔开始都是弥散条带,年前都摸过条件,都很好,但是过年之后做,一直都没有做出来,郁闷 我用EcoR1和BamH1一步双酶切pcDNA3.1+,为什么出来这样的图图一图二图一中前两个是原质粒,后面是酶切跑胶.80V120min图二是同样的,只是之前一天做的.不知道问什么条带那么丑,还有一点歪.麻烦高 用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp做过pcr验证有目的条带,想不明白是为什么.2个月了,求救 请问用什么方法做? 请问用一元一次方程怎么做? 请问用水果做动物 AFLP大板胶的片段大小在琼脂糖上的检验时会小很多,一般900左右的会变到500请问是什么原因?在大板胶上割下来的条带用TE溶解,95°水浴10min,上清为模板进行PCR扩增琼脂糖检测片段大小与大板胶