根据现有的分子生物学技术如何克隆一个目的蛋白质基因
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/29 03:50:49
根据现有的分子生物学技术如何克隆一个目的蛋白质基因
根据现有的分子生物学技术如何克隆一个目的蛋白质基因
根据现有的分子生物学技术如何克隆一个目的蛋白质基因
1.确定好是哪个蛋白基因后,上NCBI网站,查询该基因序列,做表达研究一般为mRNA序列,做调控研究一般为5‘非翻译区等调控区序列;
2.然后以该段序列为模板应用prime3或prime5设计引物(引入目标载体酶切位点),通过PCR反应把该序列大量扩增;
3.通过酶切后产生粘性末端后连入表达载体,构建成重组目标基因载体.
克隆一个基因有很多种方法,你知不知道你要克隆的基因是什么基因吗?有没有再一点是你们有没有那生物的cDNA文库呀?基因组文库呢?你所说的条件太少
根据蛋白质序列,设计一对引物,能够得到核心序列,在根据核心片段做RACE获得3‘端和5’端,然后电子拼接,根据电子拼接设计全长引物,这样获得的片段比较完整。
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