在real-time PCR中如何检测DNA污染

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 02:51:45

在real-time PCR中如何检测DNA污染
在real-time PCR中如何检测DNA污染

在real-time PCR中如何检测DNA污染
既然把DNA叫做污染,那应该是对RNA反转录后进行Real-time了.
你用未进行反转录的RNA作为模板,跑一次检测Real-time.如果没有DNA污染,这次RT是不会得到扩增结果的,因为RNA不能作为普通Taq酶的模板；一旦RNA样品里面有DNA污染,那检测RT出现扩增产物的可能性非常高.
只要RNA作为模板的Real-time PCR得到了扩增结果,那就是存在DNA污染.
PCR产物的融解曲线必须做,而且你也必须得知道这对引物二聚体的融解峰,防止引物二聚体误导结果.

如果是定量RNA，DNA肯定是会参杂的，无法避免。所以设计引物要跨内含子设计。如果是定量DNA，那就更无法避免了，只能靠引物来识别，引物是特异性的。

这个结果出来了能看出来，但是之前好像检测不了

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