real pcr
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/05 22:20:37
real pcr
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楼上的不懂不要装懂,胡说八道.
上下游引物各自应该落在两个外显子上,这样就是跨过了一个内含子,可以避免基因组的干扰.
我们知道真核生物DNA中,外显子和内含子交叉分部(外显子始终比内含子多一个),DNA的翻译只能翻译外显子,因此翻译完一段外显子后,引物需要跨内含子才能继续翻译。
比如说两个外显子中间是隔着一个内含子的,你要在这两个外显子的这段序列上设计引物的话,最好设计的引物扩增片段包含这两个外显子,即跨内含子(内含子在这两个外显子中间)。这种设计方法的优点是可以避免非特异扩增
上下游引物各自应该在不同外显子上,可以跨一个或者多个内含子,但是产物必须满足realtime的长度要求。这样可以避免基因组DNA的影响,如果实在找不到好引物或者实在倒霉就一个外显子的,RT之前需要先用DNA酶处理一下,务必把基因组的影响消除掉。...
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上下游引物各自应该在不同外显子上,可以跨一个或者多个内含子,但是产物必须满足realtime的长度要求。这样可以避免基因组DNA的影响,如果实在找不到好引物或者实在倒霉就一个外显子的,RT之前需要先用DNA酶处理一下,务必把基因组的影响消除掉。
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