pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/09 05:56:31

pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2
pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?
三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2却非常浅几乎看不到.看到有些建议是加大模板量,既然我用同一个样,目的1能扩出来很好说明模板没有问题,模板的量也应该是可以的.并且目的2在该组织中并不是本身低表达的,我加大模板量有用吗?应该怎么办?另外,我把内参和目的1上到同一个上样孔里,buffer和样品分别该加多少?

pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2
你是一直都这样还是单次啊?如果是单次的话建议换一批cDNA试试,因为做实验这种事情有时候分析得再合理,结果还是不靠谱,我前几天还有过内参p不出来的现象,目的条带都巨亮无比,又能说什么呢,有时候就是这么不正常~~~
如果是一直都这样,试过加大循环数和加大模板量都没有用的话,我还有一个不太常规的办法
你可以把你的目的2跑的胶切下来(就像是回收那样的切),放到EP管了,放到负20度冻起来,然后拿出来,化了之后ep管里会有几微升的水,把它吸出来当模板用,试试吧
当然有可能是引物的原因,你可以再看看目的2的引物看看有没有问题

pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 请问我的电泳图跑成这样,是为什么?我的模板用的是第一次PCR的产物,体系总共是60微升,模板2微我的第一次PCR用的是质粒DNA 而且产物条带还行 pcr后电泳的目的是?pcr 回收产物再做电泳的目的是? 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? pcr产物用聚丙烯酰胺电泳时加上样缓冲液是什么? 电泳时总DNA没有条带,但是能P出来,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,这能说明我得到的想要的目的片段了吗? 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? pCR试验中在电泳时,DNA分子量标准的作用,并由何构成 模版DNA浓度低怎么办 假如用PCR产物再做一次PCR 那PCR缓冲液那些是一样的嘛 SSR-PCR产物结果电泳图这是什么电泳啊?什么染色的? 胁迫处理过的RNA反转的cDNA用作模板做PCR,产物能否做转基因 DNA与PCR凝脂糖电泳问题DNA经过PCR之后与母液DNA进行凝脂糖电泳,母液DNA有显色结果,但是PCR没有,排除PCR过程可能出错的原因之外,还有可能因为什么? PCR产物电泳结果分析我在做PCR时,对产物进行检测时得到以下的电泳图,想请大师给我分析分析,谢谢.最左边的是简易Marker. pcr产物分离问题1.PCR产物中分别有360bp和340bp的产物,能用琼脂糖电泳使它们分开吗?如果可以用多少浓度的胶和多大的电压进行呢2.PCR产物中分别有1120bp和1100bp的产物,能用琼脂糖电泳使它们分 PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系 RT-PCR 中 反转之后 PCR部分 DNA 的用量我用2ug RNA 25ul体系做完反转后 pcr部分用TAKARA的TAq酶 参考是50ul体系:给的模板用量参考是:人基因组DNA 0.1-1ug ,大肠杆菌的10-100ng ,入DNA 0.5-5ng,质粒DNA 0.1-10ng