请问你的PCR问题后来怎么解决的PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从头拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 18:57:11

请问你的PCR问题后来怎么解决的PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从头拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一
请问你的PCR问题后来怎么解决的
PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从头拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧。

请问你的PCR问题后来怎么解决的PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从头拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一
PCR最重要的因素肯定是引物,其次是模板,再其次才是其他乱七八糟得东西,在确保你这两个东西都是正确的,实验前验证过后,你可以其他的东西,酶不好就直接用mix得了,虽然贵一点,但是效果也比较好,我就经常用mix.

问题不清

有可能是扩增问题。在确保试剂操作没有问题的前提下改变条件扩增条件.还有一个可能就是样品降解.

1.做退火温度的梯度实验检查退火温度是否合适。
2.适当加长延伸时间,延伸时间太短可能导致不能完全合成片段。
上述都没有问题那就很可能是引物的问题了,重新设计引物试试。祝你成功!