关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/17 06:27:10
关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30
关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,
PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?
3.PCR反应程序
细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30 s,65°C 40 s,72°C 1 min,10个循环;93°C 30 s,60°C 40 s,72°C 1 min,10个循环;93°C 30 s,55°C 40 s,72°C 1 min,9个循环;93°C 30 s,55°C 40 s,720C 5min.
下图为PCR电泳图(最底下的条带为目的条带,上面有非特异性条带)
下图为当时提的DNA图
关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30
建议做一个梯度退火温度来找到最佳的退火温度,然后再进行大量PCR!
出现非特异性条带还有可能是引物设计时的问题!
程序:变性,复性(退火),延伸
DNA是可以进行PCR的
看不到图片
如果条带不够亮,还有拖尾、非特异条带、引物二聚体等问题,那就是你反应体系中需要优化。1、出现非特异扩增可能是你的引物设计上特异性差或者引物浓度,
关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30
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