答出来会有加分啊1.参考下列20种研究方法（A-T）,分别设计一种最佳方案(包括工作思路及原理)来探究下面的10个问题.方法：A、RNAi技术; B、Southern杂交 ; C、扫描电镜技术; D、细胞显微分光光

答出来会有加分啊1.参考下列20种研究方法（A-T）,分别设计一种最佳方案(包括工作思路及原理)来探究下面的10个问题.方法：A、RNAi技术; B、Southern杂交 ; C、扫描电镜技术; D、细胞显微分光光
答出来会有加分啊
1.参考下列20种研究方法（A-T）,分别设计一种最佳方案(包括工作思路及原理)来探究下面的10个问题.
方法：A、RNAi技术; B、Southern杂交 ; C、扫描电镜技术; D、细胞显微分光光度计; E、免疫荧光技术; F、电镜超薄切片技术; G、Northern杂交; H、放射自显影技术; I、核磁共振技术; J、DNA序列分析; K、原位杂交技术; L、Western blot杂交技术; M、GFP的应用; N、电镜负染色技术; O、细胞融合技术; P、免疫共沉淀; Q、免疫电镜技术; R、冷冻蚀刻复型技术; S、BrdU incorporation ; T、DNA定点突变技术
1）探讨内质网的分布与微管系统的分布关系.
2）微管系统的动态不稳定性.
3）已克隆了鸡卵清蛋白的基因,如何证明在雏鸡的输卵管中该基因不转录而在产卵母鸡输卵管中则活跃的转录 .
4）已克隆了人的rDNA,问rDNA分布在人的哪几条染色体上.
5）M期HeLa细胞中具有促进分裂间期细胞染色质提前凝集的活性,实验证明.
6）体外培养细胞,从G1期到S期,细胞表面形态结构的变化.
7）CENP-E在细胞分裂的前中期与微管结合,以后逐渐转移到动粒上,到分裂后期转移到纺锤体的中间区.如何证明.
8）原代细胞长成致密单层,由于接触抑制作用DNA合成停止,如何证明.
9）探讨Racl基因表达的抑制对NIH3T3细胞迁移行为（如迁移路线、迁移速度等）的影响.
10）CyclinB和CDK1为MPF的两个亚基,如何证明CyclinB和CDK1的结合?

答出来会有加分啊1.参考下列20种研究方法（A-T）,分别设计一种最佳方案(包括工作思路及原理)来探究下面的10个问题.方法：A、RNAi技术; B、Southern杂交 ; C、扫描电镜技术; D、细胞显微分光光
(1)探讨内质网的分布与微管系统分布的方法如下
内质网作为一种脂质膜结构,我们可以选用放射性标记的CDP-胆碱作为标记物,CDP胆碱可以用于卵磷脂的合成.然后利用放射自显影技术进行观察.而微管由于可以被紫杉醇结合而抑制解聚,我们可以用罗丹明标记的抗微管蛋白的抗体与微管特异性结合（免疫荧光技术）,然后使用荧光显微镜观察.然后对比以上两组观测图像是否具有相关性
（2）常使用的方法是将带有罗丹明标记的微管蛋白连续注入体外培养的动物细胞,用荧光显微镜观察.
（3）1.可以利用oligo-DT或者oligo-U对提取的总RNA进行亲和层析,提取mRNA,然后用DNA探针或者RNA探针进行southern杂交.2.当然卵清蛋白作为一种蛋白质,自然可以利用免疫荧光技术.
（4）利用的是western blot.这个不细说了
（5）将M期的hela细胞与其他间期细胞在仙台病毒下诱导融合,并继续培养一段时间.发现与M期hela细胞融合的间期细胞发生了各种形态的染色体凝集,并称之为PCC（早熟染色体凝集）.这种染色体则被称为超前凝集染色体.G1为单线状,S为粉末状,G2为双线染色体状.
（6）要观察细胞表面形态结构的变化,毫无疑问利用的是扫描电镜技术.扫描电镜技术是利用电子束光源照射到细胞表面而产生的散射电子,并将其收集成像.其基本过程包括固定,脱水,干燥,镀膜,观察等过程.干燥过程一般选用CO2临界点干燥法,由于不存在气液相面,细胞的原始形态能够得到良好的保持.镀膜是为了得到良好的二次电子信号.扫描电镜成像具有良好的立体感,分辨率达0.7nm.
（7）方法是表达融合了绿色荧光蛋白（GFP,Green fluorescence protein）的CENP-E蛋白.提取并注入真核细胞.绿色荧光蛋白不是一种糖蛋白,而且是一种胞质蛋白,可以采用原核如大肠杆菌表达系统进行表达.
（8）BrdU incorporation后培养较长一段时间.只有在复制过程中的DNA才会掺入BrdU.掺入后易引起DNA突变,可对特定的某段DNA进行序列分析.
（9）虽然不知道Racl基因是为何物,但是目前使用最多的抑制基因表达的方法主要是基因打靶技术和参考中的RNAi技术.当然还有反基因技术（注意：是区别于反义RNA的技术,使用的是DNA片段）
（10）可采用荧光共振能量转移或者酵母双杂交实验,具体可以查阅百度百科.（参考中的方法无此方法）