感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/11/05 20:45:30

感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造
感受态细胞有沉淀
BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)
这两种沉淀正常么?是什么原因造成的?

感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造
一般保存是在-80摄氏度,-20度可以放一段时间,但不能太长.底部有沉淀正常,甘油只是悬浮菌体,而不能溶解,久了就会沉淀下来!转化质粒失败是其他原因,最大可能性是感受态无活性,建议重做感受态,及做即用,效果最好,剩下放置于-80度,甘油可20%.

同学，感受态制备后要立即用液氮速冻然后放到-80℃保存的。你放在-20℃不会冻结或冻结的很慢（因为你掺了甘油），菌体当然会沉淀了。这样感受态效率会很低的。

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