感受态细胞怎样制备
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/08 12:26:28
感受态细胞怎样制备
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感受态细胞怎样制备
1.将冻存的菌种1:100接种于3ml的LB液体培养基中,37℃摇床过夜震荡培养.
2.取1ml活化菌种接种于100mlLB培养基中,37℃摇床培养1.5-2h.
3.将菌种在冰上放置10min.4℃、4000rpm下离心10min收集菌体.
4.弃上清,用事先冰浴的0.1mol/Lcacl2重新悬浮细胞,冰浴30min.
5.收集菌体,条件同上.
6.弃上清,在冰浴条件下加入0.1mol/Lcacl2溶液.
7.分装保存(40%甘油与感受态细胞1:1混合,使甘油的终浓度为20%).
用Ca离子溶液处理
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