ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/14 14:44:15
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
ISSR为什么扩增不出条带
我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.
25ul反应体系中,加入
模板DNA 1ul (5ng)
ISSR引物 1ul (约5pmol)
10xPCR Buffer 2.5ul 内含镁离子
dNTP 1ul (2.5mM)
Taq酶 1单位(U)
加ddH2O 至 25ul
PCR退火温度在48-56之间.Taq酶,dNTP是新的,模板也重新提过,跑总DNA条带也很亮,用的引物别人拿去可以扩增.我现在做大多数时候都是白板无带,我很郁闷,
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
可能是小问题导致,比方说你的EP管里是不是有杂质,你的加样枪是不是漏气什么的……实验做不出来就要怀疑一切,包括你的试剂是不是被别人动过了
建议同样的体系,请别人替你做一遍,看看能不能出来结果
ISSR为什么扩增不出条带我现在做的是ISSR-PCR,体系都已经优化完成,曾经P出了较好的带,但是最近不知什么原因,好多时候都是白板无带,只有Marker很清晰.25ul反应体系中,加入模板DNA 1ul (5ng)ISSR引
一个引物PCR扩增出的多个条带为什么亮度会不同?用ISSR标记分析遗传多样性,一个引物的PCR扩增结果可以有多个条带,为什么有的条带很亮,有的条带就不太亮?
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PCR扩增不出来条带的原因?
T载体连接问题现在在做5,RACE.扩增出目的条带后胶回收,然后用特异性引物去嵌套验证,结果也有目的大小的条带扩增出来,这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的.但是用T载体连接后转化到
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做逆转录PCR,扩增出的条带怎样区分是残留基因组DNA还是反转录得到的cDNA得到的结果
PAGE电泳条带该如何分析?这是我用MSAP(甲基化敏感扩增多态性)跑出的PAGE电泳条带,感觉条带很不清晰背景色也很重。不知道该如何分析希望各位大虾指导。不甚感激!
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mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带 要不就是有拖带 这种情况是怎么回事