pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮以前跟现在步骤一样,但是结果差条带比较清晰别很大,原来,但最近做时就不清晰了,其中跑电泳时
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 09:52:35
pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮以前跟现在步骤一样,但是结果差条带比较清晰别很大,原来,但最近做时就不清晰了,其中跑电泳时
pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮
以前跟现在步骤一样,但是结果差条带比较清晰别很大,原来,但最近做时就不清晰了,其中跑电泳时电压加大了,时间加长了30分钟,不知道是不是这里出了问题,还有就是我们pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西都很亮,MARKER的上样孔也很亮,所以我们怀疑是琼脂糖(使用1年以上)出了问题,还请大家分析下.
pcr电泳结果特别不清晰,条带很模糊 连MARKER也看不清上样孔很亮,不加任何东西的上样孔都很亮以前跟现在步骤一样,但是结果差条带比较清晰别很大,原来,但最近做时就不清晰了,其中跑电泳时
你的电泳缓冲液和制胶缓冲液浓度不准或者脏了吧?换新的电泳缓冲液和制胶缓冲液试试.
marker都出问题说明是你的胶的问题,或者电泳操作的问题.
跑久了EB就会聚集到点样孔那边去,条带就会变暗,但是模糊的话,可能是胶有质量问题。
你可以把电泳时间缩短试试,或者跑一会就照一下看看,是不是EB的原因。
marker都出问题估计是跑胶环节出了问题,但你们工作都这么认真,怎么会出错呢?基本上是试剂或样品的 问题吧,换换东西再做做看吧,加油!
如果以前做的就不正常, 那么可能是引物设计的问题.
如果以前正常现在不正常, 那么可能是模板的问题, 如果是RT-PCR, 而你的RT是以前做的,十有八九是cDNA不行了.
你的Marker是新的还是以前的? 如果是以前的, 那么我上面说的就可能对, 但如果是新的也模糊, 那可能是电泳条件出问题了(如果电压太大,也会出问题).
琼脂糖一年多不会出什么问题, 再多几年也没问题...
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如果以前做的就不正常, 那么可能是引物设计的问题.
如果以前正常现在不正常, 那么可能是模板的问题, 如果是RT-PCR, 而你的RT是以前做的,十有八九是cDNA不行了.
你的Marker是新的还是以前的? 如果是以前的, 那么我上面说的就可能对, 但如果是新的也模糊, 那可能是电泳条件出问题了(如果电压太大,也会出问题).
琼脂糖一年多不会出什么问题, 再多几年也没问题
收起
这还用说么
garose gel 重配
用了一年了你们也不换
你们是做日常练习啊
还是做实验啊...
电泳液重换!长时间使用离子浓度太大影响电泳结果
缩短电泳时间 时间过长条带会跑出凝胶 无法看到P出的条带
条带不清晰说明你们的primer不纯或者primer效果差,换primer
最后就是仪器的问题
检查仪器功能是否正常,质...
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这还用说么
garose gel 重配
用了一年了你们也不换
你们是做日常练习啊
还是做实验啊...
电泳液重换!长时间使用离子浓度太大影响电泳结果
缩短电泳时间 时间过长条带会跑出凝胶 无法看到P出的条带
条带不清晰说明你们的primer不纯或者primer效果差,换primer
最后就是仪器的问题
检查仪器功能是否正常,质控很重要啊
收起