高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/07 21:14:05
高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
高保真酶的PCR结果
我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
高保真酶的PCR结果我之前用TAKARA公司的Ex-Tag酶进行PCR,可以P出较好的条带,但用了TAKARA公司的高保真酶Prime STAR GXL DNA polymerase 之后,完全看不到条带,这是为什么呢?实验做的很郁闷呢,
EX-TAQ很容易出现杂带的,这个酶本身的BUFFER是高离子浓度.你可以试试用EXTAQ酶扩出条带后,在琼脂糖胶上切下纯化在用高保真酶扩一下,扩出来就是有产物扩不出就是非特异扩增
TAKARA公司的高保真Taq酶效率比ExTaq差,这是一个普遍问题。你要克隆的基因又多长?如果不太长的话,可以直接用ExTaq扩增,或者ExTaq+高保真Taq酶扩增,然后多选几个克隆。我要扩的是1100左右的片段,我试试两种酶混合看看。 你试试看吧。1100bp的话,错配率也还可以接受,大不了多挑两个克隆。好的,谢谢拉...
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TAKARA公司的高保真Taq酶效率比ExTaq差,这是一个普遍问题。你要克隆的基因又多长?如果不太长的话,可以直接用ExTaq扩增,或者ExTaq+高保真Taq酶扩增,然后多选几个克隆。
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可以通过其他基因PCR,或让其他人用新的酶PCR,以检验是否是酶的问题