nature,made

篇一：美国保健品前20

美国各保健品功效详解(超全)

美国的保健品市场是全世界最大也是最先进的市场.

【Canker-Rid 口腔溃疡/炎症/疼痛速效康】

可迅速起效，缓解口腔溃疡、唇疱疹、热病疱疹等口腔炎症和疼痛，同时加速口腔炎症康复。使用时先用纸巾擦干患处，用棉签点涂在患处即可。

治疗预防关节炎

【Nature Made 三倍强效维骨力150粒】

适 用 于治疗和预防全身所有部位的骨关节炎，联合葡萄糖胺、软骨素和MSM三种有效成分，可有效减轻关节疼痛、肿胀，增强关节灵活性，缓解运动损伤，预防骨 质 疏松。送老人，骨关节炎、关节软骨伤和骨折患者都不错。服用方法：每日两次，每次一粒，随餐服用。或者每日一次，每次2粒。

关节健康和美丽

【Genesis Today 液体超浓缩新西兰胶原蛋白】

胶原不仅和美丽有关，人在35岁后胶原分泌量大幅度减少导致关节问题比较多。大幅度摄入胶原不仅可以营养肌肤，而且对骨关节健康大有好处，但摄入安全高浓缩是关键。Genesis Today的胶原采用新西兰小牛胶原，液体更易吸收。

糖尿病日常辅助保健品

【新章超临界萃取肉桂精华胶囊 New Chapter Cinnamonforce 120粒】 新章超临界萃取肉桂精华，比较适合糖尿病患者作为平时日常辅助的保健品服用，能有效帮助改善睡眠，改善身体的血糖指标。

推荐给睡眠质量(来自:WwW.smhaida.Com 海达 范文 网:nature,made)不好的童鞋

【Herbs Etc. Deep Sleep 深度睡眠补剂120粒】

美国制造，共120胶囊，睡觉前20分钟服用一粒，能够有效促进睡眠质量，恢复精神。液体胶囊，快速起效。帮助您快速入睡，带到深度睡眠效果，恢复精力。以新鲜草药为原料，不会形成依赖性。醒来后不打瞌睡。

护心佳品

【Carlson Labs 卡尔森 Co-Q-10 辅酶 50mg 60片】

因为 CoQ10能够显著的保护心脏，所以在许多国家被称为心脏的发动机。CoQ10可预防及控制心肌梗塞，心肌衰竭，心绞痛，心跳异常，在欧美和日本等地被推为最有效的心脏保健品。

【Nature Made CoQ10 辅酶心脏保健咀嚼软糖60粒】

拥有保健品的最高质量级别，含多种有机成分，能够高效地维持心脏健康，而且它的每瓶产品上几乎都标注“经医师推荐”字样，经美国食品与药品管理局的GMP认证

减肥佳品

【Genesis Today 臻施绿咖啡 60粒】

绿咖啡中的绿原酸提取自天然绿咖啡，可以控制糖代谢从而控制体重，而且不会影响其他如维生素、氨基酸等的摄入，并且有临床人体试验验证。Genesis Today的绿咖啡可以在Wholefoods 沃尔玛买到。

前列腺保健佳品

【New Chapter Prostate 5LX 前列腺特效配方120粒】

这款前列腺特效配方，包含超临界萃取的锯棕榈成分、南瓜籽、绿茶、荨麻籽、生姜，并含有硒，全面调节前列腺健康和泌尿系统健康，可以有效调节体内激素变化。

男人保健佳品

【US time 美国时刻玛卡粉复合胶囊 100粒】

美 国时刻玛卡由美国GMP企业生产，原料是秘鲁进口，采用二氧化碳临界萃取技术提取maca因子，主要成分玛卡烯、玛卡酰、生物碱、高能量亚油酸和亚麻酸， 提高肾脏自我修复能力排除肾脏毒素，前列腺毒素，扫除肾脏疲惫，加速新陈代谢有利于改善睡眠质量，提高精子活度和质量，调节内分泌，增进男性欲望，提升性 能力生育能力。

缓解眼睛疲劳

【SOLGAR经典护眼配方 60粒】

Solgar最经典最出名的产品，富含叶黄素、小米草、越橘提取物3大护眼物质。对维护眼睛的健康有着重要的作用。可保护视网膜免受脂肪氧化的伤害，对改善视网膜黄斑性病变有很好的效果。抑制破坏眼球细胞的酶。

【Jarrow 杰诺视力全效优化胶囊 180粒】

内含多酚抗氧化剂，有效减低和改善眼睛疲劳，促进眼部舒适；葡萄籽精华支持毛细血管及的眼睛内的微细血管；硫辛酸，硒，维生素B2的抗氧化剂谷胱甘肽支持和谷胱甘肽过氧化物酶，可以保护眼球晶体；银杏叶精华促进血液循环。

【 Now Foods 强效护眼素/缓解视疲劳 120粒】

适合假性近视、用眼过度、高度近视、视力退化人群，经常用眼的童鞋们必备的一款保健品。含越橘和叶黄素等强效护眼成分，可改善眼部血液循环，消除眼部致病因素，提供眼部所需营养，电脑族们可以留意下

【Vitafusion 叶黄素+多种维生素成人小熊糖50粒】

可缓解眼部疲劳，改善视力，富含叶黄素、维生素A/C/E/B6/B12、叶酸、锌等有益视力的成分，和宝宝吃的一样不添加任何色素、香料和防腐剂。

对抗糖尿病

【美国Nutrigold Gymnema GOLD 武靴叶萃取物 素食胶囊 500mg*90粒】 武靴叶子降血糖，能够改善糖尿病。减少人对甜食的摄取，让多余卡路里及糖份不被吸收，这样就能降低血糖，抑制糖分被吸收，还能达到良好的瘦身效果，被称为“糖分杀手”！

细胞修复专家

【美国制药百福生优氏牌盐藻复合胶囊 60粒】

唯一一款添加褐藻的盐藻，富含β-胡萝卜素和盐藻多糖，被吸收后，会与人体细胞完美结合，迅速转化成人体一部分。迅速捕捉、修复受损细胞，并使人体免疫系统再生能力恢复，机体重获年轻。

50岁以上男性保健

【Nature Made 50 中老年男性复合维生素90片】

专为50岁以上男性设计，含有22种重要维生素和矿物质，可修复并强健骨骼肌肉，改善心脏等器官功能，抗氧化，加强免疫力，缓解疲劳，增强心智灵活性。

2岁以上宝宝补钙最佳品

【L'il Critters Gummy Bears with Vitamin D 小熊宝宝维生素D软糖190粒】

美国L'il Critters 小熊糖Vitamin D软糖,内含纯天然莓果、樱桃和黑莓口味，纯水果中提取，不含人工香料、色素和添加剂，可以放心给孩子服用，吃起来象吃糖的感觉，深受儿童喜爱。小熊糖提供儿童每日所需的钙质与维他命D。

最好吃的DHA

【Vitafusion 成人Omega-3果味小熊糖 60粒*3瓶】

小熊糖不止是宝宝的专利哦，这款专为成人设计的美味小熊糖，每粒富含50mg Omega-3(EPA/DHA)，辅以维生素A/C/D/E，具有补脑、护眼、提高免疫力、预防心血管疾病的作用，没有鱼腥味，每日1粒

应对中老年人关节疼痛和骨刺

【美国Schiff 葡萄糖胺骨胶原】

补充葡萄糖胺骨胶原可以有效修复受损的软骨，使其逐渐恢复弹性，并减少硬磨擦，减少骨质增生，消除疼痛。此品年轻时服用可有效维持健康的关节，中老年服用可减轻关节疼痛和骨刺的困扰

【全家都适用】

【US time 美国时刻雨生红球藻虾青素 60粒】

好评率最高的一款虾青素，虾青素可以穿透血脑屏障，对白内障、飞蚊症，三高人群，色斑细纹，各种慢性病，动脉硬化、冠自病、缺血性脑损伤病人都有很好的作用

【给更年期女性】

【BAYER 拜耳 One A Day 女性更年期复合维生素50粒】

专门为更年期女性设计，除了普通的维生素和矿物质外额外添加了大豆异黄酮，同时添加更多的钙，长期服用可以增强骨骼强度，预防骨质疏松，改善皮肤，发质和指甲亮度，增加抵抗力，提高再生系统免疫力。

预防高血压和心脑血管病

【Nature Made Fish Oil Omega-3 1200mg深海鱼油300粒装】

篇二：全球知名保健品品牌

全球知名保健品品牌

安利 Amway

总部位于美国的安利公司经过40多年的快速发展，自有总资产已达500多亿美元（零负债），在世界500强企业中排名第27位；在最有价值世界品牌国际排名中列第9位（位于Sony等许多名牌之前）；在全球80多个主要国家中均展开……

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雅芳 Avon

始终引领世界最新潮流的国际美容巨子，全美500家最有实力的企业之一，一家属于女性的公司。雅芳深信，女性的进步和成功，就是雅芳的进步和成功。 1886年，“雅芳之父”大卫·麦可尼(David McC…… 网址：http://pp.ppsj.com.cn/Avon/

麦克森 McKesson

McKesson公司是全球领先的供给、信息和保健管理产品及服务供应商。所提供的产品和服务旨在为整个保健行业降低成本提高质量。McKesson公司的解决方案有助于保健专业人员高效率地提供服务和增加服务能力。公司既为制药、内科/外科提……

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玫琳凯 marykay

玫琳凯的所有皮肤保养品及彩妆都采用最先进的科技调制而成，确保产品的品质及顾客的满意度是公司的首要目标。 品质控管是玫琳凯责无旁贷的任务，包装材质的严密检验，微生物科技的样品抽检、人员及电脑系统同步检控生……

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卡地纳健康 CardinalHealth

美国卡地纳健康集团是全球百强企业,专业从事健康营养品、保健食品科研、生产及医疗健康的全球性销售的跨国集团。卡地纳国际集团是美国90%医院药品及营养食品为供应商。现在全球健康营养食品、生物学领域顶尖科学院和世界著名的国际生物学家……

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健安喜 GNC

美国GNC健安喜是美国最大的健康食品连锁店，在全球拥有6400多家专卖店，在全球有很高的知名度。GNC专业从事草本植物、动物和食物中有效成份提取物的研发、生产和销售。秉承“天然的才是最好的”理念，GNC按企业标准对原料严格筛选，确……

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Martek

Martek的历史---具有远见卓识的关于植物营养的研究 Martek生物科技, 创建于1985年,当国防和航天承包商马丁马芮娜任命了一些科学家让他们研究在长期的航天飞行中藻类的用途.在这个项目的过程中,这些科学家来相信……

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美国人伯根 AmerisourceBergen

美国人伯根公司是一家提供卫生保健和医药的专业公司，产品遍及美国、加拿大和英国。公司创建于1985年，总部位于宾西法尼亚州切斯特市。 …… 网址：http://pp.ppsj.com.cn/AmerisourceBergen/

汤臣倍健 by-health

美国倍健BY-HEALTH公司是专业从事营养补充剂开发的企业。BE HEALTHY BE HAPPY（一生健康，一生幸福）是倍健公司的企业理念，天然营养与健康是倍健公司产品的宗旨。 苛刻的原料来源审核

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普瑞登 PuritansPride

PuritanChina致力于提供给中国的广大用户全球最新的健康科技资讯，在这里您可以得到全球领先的，客观公正的抗衰老，抗氧化的资讯信息。延长人类寿命，让您更年轻是我们的目标。 PuritanChina devotes ……

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纽崔莱 nutrilite

纽崔莱是世界著名的营养食品品牌，1998年由安利公司引入中国，在短短5年内销售额从零攀升至逾30亿元，占据了安利（中国）的半壁江山，但纽崔莱品牌系列产品在安利（中国）的整个产品线中只占1/10弱的产品品种比例。纽崔莱连……

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好事多 Kirkland

Kirkland Signature是全美销量第一的健康品牌,旗下多种保健品都享有非常高的知名度! 它是美国著名仓储零售商之王Costco（中文名: 好事多）的自有品牌。Costco在美国和加拿大开有共计50……

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Nature Made

Natrue Made品牌是美国著名品牌保健品之一。美国顶级保健品牌Nature Made,高品质的象征。经美国食品与药品管理局的GMP认证，绝大部分品种是USP药品级质量，这是保健品的最高质量级别，而且它的每瓶产品上几乎都标注“……

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Now Foods

nowfoods保健品NOW天然(Natural)有机(Organic)全方位健康(Wholesome)保健食品第一品牌>NOW FOODS公司位于美国伊利诺州，创立于一九六八年，为美国最大的天然保健食品生产商之一。作为美国上市公……

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Nature’s Way

美国第一大草本品牌 Nature's Way: NATURE'S WAY 美国顶级保健品厂家, Nature's Way 是美国甚至全世界自然保健业的带头人-她专精于高品质的自然保健药品. 凡标有N……

网址：http://pp.ppsj.com.cn/NaturesWay/

NSI

NSI--NUTRACEUTICAL SCIENCE INSTITUTE(营养制药科学院)是 美国备受注册医药师推崇的一家营养补剂生产商及经销商。其创始者是一些著名的医师，他们的宗旨就是大胆挑战医疗界对营养补剂的偏见，用大量的科学……

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康宝莱 herbalife

康宝莱国际公司总部设在美国洛杉矶的Century City，信息中心设在

Inglewood， 公司全球的生产基地及物流中心设在市郊的Carson，公司员工达2000多人。 同时公司在全球65个国家和地区设有分公司。

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安利雅姿 ARTISTRY

ARTISTRY，中文译作“雅姿”，由其英文原意“艺术技巧”，延展出“典雅高贵、顾盼生姿”的品牌内涵。迈入新世纪，为赋予品牌更富时代感的特性，安利推出全新的雅姿品牌标志，在承继其高雅时尚的品牌内涵的基础上，展露雅姿富于时代感、更具……

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金施尔康 GoldTheragran

金施尔康? 维生素系列成人产品，拥有金施尔康、安尔康及维康福三大知名品牌。作为中美上海施贵宝的明星产品，自面世以来，一直深受广大消费者的青睐。 2007 年，金施尔康? 维生素系列成人产品喜换新装，让您时……

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vitamin world vitaminworld

美国一流品牌Vitamin World公司在全美有550多个专卖连琐店，无论是在美国的大城市纽约还是旧金山，还是在美国的中小城市，到处能看见Vitamin World的招牌。选择Vitamin World，选择高品质，选择健康。<……

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美乐家 melaleuca

美乐家公司(Melaleuca Inc.)于1985年由总裁暨首席执行官范德士 (Frank L. VanderSloot)先生所创立。 总公司设立于美国爱达荷州．爱达荷市(Idaho…… 网址：http://pp.ppsj.com.cn/melaleuca/

优莎娜 USANA

· 美国USANA健康高科技公司成立于1992 年，已在美国NASDAQ上市，代号为USNA； · 由微生物学及免疫学专家华斯博士领衔，他创办的高尔实验室曾在人类细胞培植及疾病诊断方面居世界领导地位； ……

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L’il Critters

美国家庭必备的儿童补充营养品——小熊家族！ L'il Critters 儿童保健产品美国市场占有率第一，几乎美国每一个有孩子的家庭都会使用L'il Critters的产品。 ****不含人工色素,香料和防腐剂*……

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Twinlab

Twinlab Corporation专门从事1200多种不同营养品的生产和销售。Twinlab在纽约州曼哈顿市、密西西比州大湍城和犹他州美福克市设有办事处，是高品质科学营养品的领先生产商，全系列产品包括运动营养品、维生素、矿物质……

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NeoCell

NeoCell公司位于加利福尼亚州的新港海岸.1997年公司获得了胶原蛋白补

篇三：美国保健品品牌大全

安利

品牌世家：.cn

总部位于美国的安利公司经过40多年的快速发展，自有总资产已达500多亿美元（零负债），在世界500强企业中排名第27位；在最有价值世界品牌国际排名中列第9位（位于Sony等许多名牌之前）；在全球80多个主要国家中均展开业务，凭借其优质的高?? 网址：http://pp.ppsj.com.cn/Amway/

雅芳

始终引领世界最新潮流的国际美容巨子，全美500家最有实力的企业之一，一家属于女性的公司。雅芳深信，女性的进步和成功，就是雅芳的进步和成功。 1886年，“雅芳之父”大卫·麦可尼(David McConnell)从一瓶??

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麦克森

McKesson公司是全球领先的供给、信息和保健管理产品及服务供应商。所提供的产品和服务旨在为整个保健行业降低成本提高质量。McKesson公司的解决方案有助于保健专业人员高效率地提供服务和增加服务能力。公司既为制药、内科/外科提供供应链管理服务，也??

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玫琳凯

玫琳凯的所有皮肤保养品及彩妆都采用最先进的科技调制而成，确保产品的品质及顾客的满意度是公司的首要目标。品质控管是玫琳凯责无旁贷的任务，包装材质的严密检验，微生物科技的样品抽检、人员及电脑系统同步检控生产线，都是为了确保品??

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卡地纳健康

美国卡地纳健康集团是全球百强企业,专业从事健康营养品、保健食品科研、生产及医疗健康的全球性销售的跨国集团。卡地纳国际集团是美国90%医院药品及营养食品为供应商。现在全球健康营养食品、生物学领域顶尖科学院和世界著名的国际生物学家进行广泛的技术合作，??

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健安喜

美国GNC健安喜是美国最大的健康食品连锁店，在全球拥有6400多家专卖店，在全球有很高的知名度。GNC专业从事草本植物、动物和食物中有效成份提取物的研发、生产和销售。秉承“天然的才是最好的”理念，GNC按企业标准对原料严格筛选，确保产品保持一贯的纯天??

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Martek

Martek的历史---具有远见卓识的关于植物营养的研究Martek生物科技, 创建于1985年,当国防和航天承包商马丁马芮娜任命了一些科学家让他们研究在长期的航天飞行中藻类的用途.在这个项目的过程中,这些科学家来相信藻类代表了一个几乎未??

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美国人伯根

美国人伯根公司是一家提供卫生保健和医药的专业公司，产品遍及美国、加拿大和英国。公司创建于1985年，总部位于宾西法尼亚州切斯特市。??

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普瑞登

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纽崔莱

纽崔莱是世界著名的营养食品品牌，1998年由安利公司引入中国，在短短5年内销售额从零攀升至逾30亿元，占据了安利（中国）的半壁江山，但纽崔莱品牌系列产品在安利（中国）的整个产品线中只占1/10弱的产品品种比例。纽崔莱连续5年保持高速增长，?? 网址：http://pp.ppsj.com.cn/nutrilite/

好事多

品牌世家：.cn

Kirkland Signature是全美销量第一的健康品牌,旗下多种保健品都享有非常高的知名度! 它是美国著名仓储零售商之王Costco（中文名: 好事多）的自有品牌。Costco在美国和加拿大开有共计500多家分店，被誉为是??

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Nature Made

Natrue Made品牌是美国著名品牌保健品之一。美国顶级保健品牌Nature Made,高品质的象征。经美国食品与药品管理局的GMP认证，绝大部分品种是USP药品级质量，这是保健品的最高质量级别，而且它的每瓶产品上几乎都标注“经医师推荐”字样，请?? 网址：http://pp.ppsj.com.cn/NatureMade/

Nature’s Way

美国第一大草本品牌 Nature's Way: NATURE'S WAY 美国顶级保健品厂家, Nature's Way 是美国甚至全世界自然保健业的带头人-她专精于高品质的自然保健药品. 凡标有Nature's Wa??

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Now Foods

nowfoods保健品NOW天然(Natural)有机(Organic)全方位健康(Wholesome)保健食品第一品牌>NOW FOODS公司位于美国伊利诺州，创立于一九六八年，为美国最大的天然保健食品生产商之一。作为美国上市公司，NOW FOOD??

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NSI

NSI--NUTRACEUTICAL SCIENCE INSTITUTE(营养制药科学院)是美国备受注册医药师推崇的一家营养补剂生产商及经销商。其创始者是一些著名的医师，他们的宗旨就是大胆挑战医疗界对营养补剂的偏见，用大量的科学证据教育消费者及医??

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康宝莱

康宝莱国际公司总部设在美国洛杉矶的Century City，信息中心设在Inglewood，公司全球的生产基地及物流中心设在市郊的Carson，公司员工达2000多人。同时公司在全球65个国家和地区设有分公司。康宝莱在海??

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安利雅姿

ARTISTRY，中文译作“雅姿”，由其英文原意“艺术技巧”，延展出“典雅高贵、顾盼生姿”的品牌内涵。迈入新世纪，为赋予品牌更富时代感的特性，安利推出全新的雅姿品牌标志，在承继其高雅时尚的品牌内涵的基础上，展露雅姿富于时代感、更具魅力的品牌个性与形象??

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金施尔康

金施尔康? 维生素系列成人产品，拥有金施尔康、安尔康及维康福三大知名品牌。作为中美上海施贵宝的明星产品，自面世以来，一直深受广大消费者的青睐。 2007 年，金施尔康? 维生素系列成人产品喜换新装，让您时刻充满活力，为您健康??

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美乐家

美乐家公司(Melaleuca Inc.)于1985年由总裁暨首席执行官范德士 (Frank L. VanderSloot)先生所创立。总公司设立于美国爱达荷州．爱达荷市(Idaho Falls,Ida??

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品牌世家：.cn

优莎娜

·美国USANA健康高科技公司成立于1992 年，已在美国NASDAQ上市，代号为USNA； ·由微生物学及免疫学专家华斯博士领衔，他创办的高尔实验室曾在人类细胞培植及疾病诊断方面居世界领导地位； · USANA的??

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L’il Critters

美国家庭必备的儿童补充营养品——小熊家族！L'il Critters 儿童保健产品美国市场占有率第一，几乎美国每一个有孩子的家庭都会使用L'il Critters的产品。 ****不含人工色素,香料和防腐剂**** *??

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Twinlab

Twinlab Corporation专门从事1200多种不同营养品的生产和销售。Twinlab在纽约州曼哈顿市、密西西比州大湍城和犹他州美福克市设有办事处，是高品质科学营养品的领先生产商，全系列产品包括运动营养品、维生素、矿物质、保健食品、药草和茶??

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NeoCell

NeoCell公司位于加利福尼亚州的新港海岸.1997年公司获得了胶原蛋白补充产品的生产线,这条生产线自从1986年就已经在市场上运营.公司致力于开发创新高效抗衰老的护肤产品,营养补充剂,自然顺势疗法的补救以帮助人们保持健康的生活方式. 通??

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嘉康利

嘉康利是一家天然营养补充食品公司，50年以来，我们致力于改善人类的健康，同时也致力于地球的环保事业。当人们尚未意识到环保的重要性、“可生物分解”这个名词尚未问世之前，嘉康利便投身于环保事业！早在1960年，嘉康利便研发出第一?? 网址：http://pp.ppsj.com.cn/shaklee/

善存

来自美国惠氏-百宫的善存，是适合所有人群服用的复合维生素和矿物质制剂。每天一粒善存，全面的A-Zn配方,能补充30种维生素和矿物质，全方位巩固每个人的健康基础。?? 网址：http://pp.ppsj.com.cn/centrum/

篇四：nature protoc 中文方法

试剂准备:

蒸馏水（dH2O）以0.22μm过滤除菌。

表1是组织解离液和混合酶的配方。

表2是无血清培养液（SFM）添加组分。

SFM是DMEM/F12（1:1）加L-谷氨酰胺和15mM HEPES。成分添加后用0.22微米孔径过滤器滤菌。生长因子（EGF和FGF）、B27和ITSS是加入无菌SFM。

SFM的添加成分：

腐胺（100x）－溶解0.096g到100ml dH2O，0.22μm过滤除菌（4℃保存）。

孕酮（1000x）－溶解0.00629g于100ml dH2O，0.22μm过滤除菌（4℃保存）。 1.0M HEPES。

B27。

提示：过去几年，添加物经常出问题，必须提前检查试剂的有效性。

ITSS（Roche cat. no. 1074547）－溶于5ml无菌dH2O（1000x），分装100μl每管，－20℃保存，SFM中要加1管。

肝素－溶解0.05g到2ml无菌dH2O（4℃保存）。

胰蛋白酶抑制剂－1.0 mg/mlSFM用前现配。

TrypLETM express (Invitrogen cat. no. 12604-021)。

生长因子：

FGF（Sigma cat. no. F0291）– 25 μg溶解于1.0 ml 5mM Tris（pH 7.6），0.22μm过滤除菌，20μl/管分装（－20℃保存），每100ml SFM加1管。

EGF（Sigma cat. no. E4127）－0.1mg溶解于1ml含0.1%BSA的PBS。0.22μm过滤除菌，20μl/管分装（－20℃保存），每100ml SFM加1管。

关键点：

生长因子的生物学活性随着时间逐渐降低。为得到最好结果，用前当天现添加进去。我们使用配7天的培养液来传代神经球。

时间安排: 所有试剂事先准备好以后，解剖及平板接种细胞程序将需要2-3个小时（取决于经验）。

Quote:

Procedure步骤

手术前准备

1. 水浴锅温度调至37°C。

2. 组织解离液置95%O2 5%CO2培养箱中10min。

3. 用95%乙醇消毒解剖区。

4. 用消毒溶液消毒解剖器械（戊二醛，后用无菌dH2O冲洗，浸泡在95%乙醇中）。

5. 在3个60 × 15 mm皿中各加3ml的组织解离液。

提示：除无菌显微解剖器材外，还要三套消毒器械，分别用于剥离皮肤、颅骨和脑，减少用手污染的机会。消毒过的解剖器械可以浸泡在无菌组织剥离液中，以避免乙醇接触组织。

分离大脑

6. CO2麻醉小鼠，小于3周则直接断头。

7. 剃去头顶的毛发。

8. 用浸泡过聚维酮碘消毒的纱布擦洗头部并且去除松散的毛发。

9. 用泡过95％乙醇消毒纱布擦洗头部。

10. 用手术刀片延中线全长切开头皮。

11. 掀开皮肤显现出头盖骨。

12. 从双耳后切开头皮暴露头盖骨侧面。

13. 用小剪刀在两边切开头盖骨（打开头盖骨上部，避免损伤脑组织）。

14. 用镊子掀开头盖骨。

注意：不能用表面有乙醇的解剖工具接触脑组织。乙醇能使组织固定。

15. 用弯镊在脑底部滑动以切断连接脑底部的脊髓、血管和颅神经。

提示：用弯镊时轻微向下用力抵住脑下面的颅底。来回滑动松动脑组织。

16. 用同一个弯镊将脑移到盛有解离液的60mm皿中。

17. 剥离大脑表面的脑膜，冲洗干净，把脑放入第二个盛有解离液的60mm皿中。

提示：在解剖显微镜下很容易剥离脑膜。

18. 解剖镜下，沿中线切开大脑，精细镊分离目脑区。

提示：虽然所有脑区都能产生神经球，但特殊的区域会产生更多神经球。集中分离形成脑室的细胞层（主要是SVZ、海马、从室下区到嗅球的吻侧迁移流），这些区域将产生更多神经球。参考发育和出生后脑图谱。

19. 将分离组织放置于第三个盛有解离液的60mm皿中。

20. 用10号弯头手术刀将组织切成小块（约1 mm3）

提示：操作经验和解剖显微镜对组织块切割很有帮助。小组织块更容易分散并产生更多神经球。

分散脑组织

21. 将盛有小块组织的培养皿移到超净台，然后用移液管将组织块移到5ml的圆底聚丙烯管中。

22. 250g离心1min。

23. 弃上清，加入酶混合液（1ml）

提示：如果不需要特殊的脑组织区域，可取仔鼠（小于一周）的整脑以获得最多的神经球。在这种情况下，整个脑分到两个试管，每个试管加入1ml的混合酶消化。动物越年轻产生的神经球越多。

24.将试管水浴至少40min（新生至一周）或大约1.5h（2个月以内的年轻成体），每隔20分钟用移液管适当吹打。

提示：密切关注组织的解离状况。具体的时间取决于动物的年龄。几个月大的动物需要2－3小时消化。细胞活力会因过长的消化时间而下降。

注意：新生脑组织在混合酶的作用下很快消化。过度消化会减少细胞存活。

25. 250g离心5min，弃上清。

26. 加入4ml蛋白酶抑制剂。

27. 用移液管吹打10次以分散沉淀，注意尽量别产生气泡。

28. 水浴10min。

29. 500g离心5min，弃上清。

30. 用0.5ml SFM重悬细胞，充分吹打以产生单细胞悬液。

提示：建议用火焰钝化的小抢头制备单细胞悬液。

接种细胞

31. 用血细胞计数器计数并调整活细胞浓度。台盼兰染色排除死细胞。

提示：接种10-15 cells/μl有利于建立单个神经球的培养。如果你不做克隆分析且想获得更多神经球，可提高接种密度（如50-100 cells/μl）。高密度接种可加快神经球的形成，并缩短首次传代时间间隔。

用血细胞计数器和台盼兰测定细胞活性，详细见网页：

/content/sfs/appendix/Cell_Culture/Viable%20Cell%20Counts%20Using%20Trypan%20Blue.pdf

/protocolstools/protocol.jhtml?id=p2151

/pdfdocs/Cell%20Documents/hemat.pdf

32. 在24孔板每孔中加入0.5ml含细胞SFM。

33. 37°C 95% air 5% CO2培养。

神经球的传代

提示：在合并培养物前应检查每个孔是否污染，特别是在第一次传代时。严重污染使PH值降低，培养液颜色明显改变（变黄）。轻微污染也较常见，无法通过观察培养液颜色判断，需在相差显微镜下观察。如果你忽略了一个污染孔，下一代的所有孔都会被污染！

1. 将所有神经球和培养液移到15ml锥形管。

2. 200g离心5min。

3. 弃上清，加入2ml TrypLETM。

4. 用移液管混合神经球和TrypLETM。

5. 37°C水浴20min。

6. 500g离心5min。

7. 弃上清，加0.5ml SFM重悬细胞。

8. 用移液管吹打（60－70次）

提示：吹打过程中避免产生气泡。过多气泡会降低活细胞数并增加污染机会。

9. 用台盼兰计数细胞密度，排除死细胞，按所需密度接种到新24孔板。37°C 95% air 5% CO2培养。

提示：神经球传代的最佳时间常根据试验需要和时间安排确定。如果平均每孔至少25个神经球，那么可以传2个板。如果有50个神经球，那么很容易从原24孔板传3个板。镜台测微尺可标准化相差显微镜的目镜焦距。便于快速确定神经球的大小，见图1b。

神经球的冻存和复苏

1. 将含有神经球的培养液从24孔板移入15ml圆锥管。

2. 200g离心5min。

3. 弃上清，用10ml含15％DMSO的SFM（不含EGF 和FGF）重悬细胞。

4. 用移液管轻轻混匀，分装1.5ml每管（聚丙烯冷冻管）。

5. －80°C冰箱过夜。【译者加：我们通常在－20°C冻1－2h再转－80°C】

6. 次日晨转移至液氮罐保存。

提示：如果不能使用液氮，神经球可以在－80°C保存几周。活神经球数量会随－80°C存放时间延长而减少。

7. 准备复苏神经球，将冷冻管从液氮中取出，在超净台内回复至室温。

8. 将冷冻管内容物转入含有10ml SFM的15ml圆锥管中。

9. 200g离心5min，弃上清。

10. 用4ml SFM轻轻混匀。

11. 按每孔0.5ml种8个孔（24孔板）， 37°C 95% air 5% CO2条件下培养。

提示：小神经球比大神经球（直径大于100um）更易复苏成活。在组织培养基中，神经球复苏成活率很低（小于20％）。建议每孔至少种50－100个神经球。通过提高冷冻神经球密度或在冷冻液中加入20％胎牛血清可提高复苏成活率。但要牢记胎牛血清可以诱导分化。 以前在园子里经常提问关于神经干细胞的问题，得到大家不少帮助。现在我养了一段时间神经干细胞了，想把一些经验跟大家汇报一下，也希望对其他要养神经干细胞的同胞们有一些帮助。如果版主能够给我加分，我就更加开心了，目前还是零分，对于需要一定分数才能看的帖子我是非常期待啊，恳请版主了。好，说正题。

兔的神经干细胞培养，

1取原代：选择胚兔，选在怀孕16-18天的孕兔上，尽量选择早一点的时间。以前我做过18-21天的，胚兔体积较大，头部已有颅骨形成，脑组织发育较完全，后期吹打时不易吹散。16-18天的虽然胚兔刚刚成形，体积小，骨骼少，比较象一团组织而无自己的支撑，但脑部体积却不小，仅剥离一层膜就可见，脑组织各个部分刚刚可见成形，非常易吹打为悬液。境下分离出海马部分，这个步骤比较需要技巧和解剖知识，尽量分离出最好的取材部分，同时我也使用其他部分作为原代培养。要注意的尽量剥离干净血管和脑膜。整体取材过程严格无菌，使用双抗PBS。取好的部分放入离心管吹打成悬液，后离心1000rm、10min。加入一些培养液吹散后将其静置沉淀1min，吸取上清离心。因为所取组织非常易吹散至悬液，所以我没有使用滤网，这与18-21天的是不同的，后者必须要用滤网去除未吹散的组织块。将离心后的细胞重新吹散为悬液，稀释后计数，最终以2×106 in 6ml/25cm2培养瓶或6×106 in 10ml/75cm2培养瓶种植，每2、4、6天加1ml、2ml培养液入瓶。如果全部脑组织都使用，基本上会有20-30瓶。在24-48h后就可见出现神经球，大约5-7d大部分神经球增多增大，以神经球增大至100um为传代标准。

2传代：将培养瓶内培养液及神经球移至离心管，培养瓶可稍稍清洗将残留的球也收集移入离心管，传代后换新的培养瓶。离心1000rm10min，去上清，留下200ul用定量在180-190ul的移液器吹打100次，必要时可加吹20-30次。由于移液器伸入离心管操作易污染，所以我将离心后的细胞以及200ul培养液先移至EP管内，在此进行吹打，吹打前枪头需湿，避免枪头粘到神经球下不来，吹打时枪头不要贴壁，不要吹打出大量气泡，易损伤细胞。吹打为悬液后计数以5×105 in 6ml/25cm2培养瓶或1.5×106 in 10ml/75cm2培养瓶种植，每2、4、6天加1ml、2ml培养液入瓶。以神经球增大至100um为传代标准。

3培养液我使用的为DMEMF12+bFGF10ng/ml＋EGF20ng/ml＋B272ml/100ml。传代后总会出现部分神经球融合和贴壁分化现象，我同意园子里的前辈的一些看法，比如取材部位不同、接种密度等的影响，且随着传代次数增加这种现象增多，或许到后期纯化程度增加后会改善，我还要继续探索，也请大家指教吧。

P2代的神经球[img][/img][img][/img]

篇五：海淘精选1：产前妈妈篇

海淘清单1：必备的母婴用品(妈妈用品篇）

V： iCEhaosq 俗话说的好："女人是十个月的公主，

一个月的皇后"，就是说的准妈们哦！初为人母、人父相信很多爸爸妈妈都会紧张或者准备不足，为了让妈妈们在待产期以愉快的心情生下健康的宝贝，帮主为妈妈们整理了一些孕期必备的母婴用品，当然这些也都是在海淘中大家所熟知的海淘精品！

怀孕一般分为五个时期：怀孕前的准备、怀孕早期、怀孕中期、怀孕后期、哺乳期。 下面我们就针对这五个时期为妈妈们整理所必须的一些用品！

一、怀孕前的准备

建议妈妈们在准备怀孕的前六个月开始服用叶酸，这样有助于防止胎儿畸形。保持良好的作息时间及生活习惯。

(1)Nature Made 准妈妈必备叶酸片：Nature Made经美国食品与药品管理局的GMP认证，而且它的每瓶产品上几乎都标注“经医师推荐”字样，可以放心购买和食用。

(2) 拜耳 One A Day 孕妇维生素含叶酸＋DHA 90粒 提供孕产妇最全面营养。专为满足妊娠期（包括孕前期）和哺乳期妇女额外营养需求而研制开发的复合营养素制剂，被证实能有效提高生育率。配方中的叶酸，经过国际临床试验验证，会降低孩子大脑或脊髓出生缺陷的概率，对预防神经管畸形最有效，并能有效减轻孕妇早孕反应，如恶心，呕吐和眩晕，以及其他孕期

并发症，如抽筋，贫血，流产，早产，先兆子痫等。支持怀孕期间孩子大脑和眼睛的健康发展，有减轻炎症，抗感染及抗氧化作用。

(3) 如果单纯的叶酸片太乏味也可以考虑Vitafusion 熊宝宝成人维生素软糖：这款产品含有叶酸、Omega 3 DHA、维生素A/C/D等营养物质，浆果、柠檬和樱桃3种口味混合装。不含人工色素和香料，不含铁，适合准妈妈和准备怀孕的女性。可以作为准备怀孕的妈妈们的必要补充。

二、怀孕早期

这一时期的妈妈们要特别注意，前3个月属于不稳定期，容易发生先兆流产，如果发生了孕妈们也不必太惊慌，及时就医即可。当然这一时期也是孕吐最严重的时期，所以在生活细节上要尤为留心。这一阶段孕妈们需要准备的包括孕妇专用护肤品、洗漱用品、服饰用品等.

★★★洗簌用品★★★

(1)加州宝宝超级防敏的洗发沐浴液：这款是那种洗脸和沐浴都可以用的，感觉很清新，一点都不刺激，即便囤货多了，以后宝宝出生都是可以继续使用的。

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阅读宝宝篇请点击：海淘清单3：从怀孕到育儿必备的母婴用品(宝宝篇）

一、怀孕前的准备

建议妈妈们在准备怀孕的前六个月开始服用叶酸，这样有助于防止胎儿畸形。保持良好的作息时间及生活习惯。

(1)Nature Made 准妈妈必备叶酸片：Nature Made经美国食品与药品管理局的GMP认证，而且它的每瓶产品上几乎都标注“经医师推荐”字样，可以放心购买和食用。亚马逊购买链接

(2) 拜耳 One A Day 孕妇维生素含叶酸＋DHA 90粒 提供孕产妇最全面营养。专为满足妊娠期（包括孕前期）和哺乳期妇女额外营养需求而研制开发的复合营养素制剂，被证实能有效提高生育率。配方中的叶酸，经过国际临床试验验证，会降低孩子大脑或脊髓出生缺陷的概率，对预防神经管畸形最有效，并能有效减轻孕妇早孕反应，如恶心，呕吐和眩晕，以及其

他孕期并发症，如抽筋，贫血，流产，早产，先兆子痫等。支持怀孕期间孩子大脑和眼睛的健康发展，有减轻炎症，抗感染及抗氧化作用。 亚马逊购买链接

(3) 如果单纯的叶酸片太乏味也可以考虑Vitafusion 熊宝宝成人维生素软糖：这款产品含有叶酸、Omega 3 DHA、维生素A/C/D等营养物质，浆果、柠檬和樱桃3种口味混合装。不含人工色素和香料，不含铁，适合准妈妈和准备怀孕的女性。可以作为准备怀孕的妈妈们的必要补充。亚马逊购买链接

二、怀孕早期

这一时期的妈妈们要特别注意，前3个月属于不稳定期，容易发生先兆流产，如果发生了孕妈们也不必太惊慌，及时就医即可。当然这一时期也是孕吐最严重的时期，所以在生活细节上要尤为留心。这一阶段孕妈们需要准备的包括孕妇专用洗漱用品、孕妇专用护肤品、服饰用品等.

★★★洗簌用品★★★

(1)加州宝宝超级防敏的洗发沐浴液：这款是那种洗脸和沐浴都可以用的，感觉很清新，一点都不刺激，即便囤货多了，以后宝宝出生都是可以继续使用的。

(2)Aveeno婴儿舒缓燕麦沐浴露：比较适合孕吐比较严重的孕妈，对香味会比较敏感，这款的味道比较轻，不油腻，很温和，泡沫不是特别多。其实这款主要是针对婴儿，想宝宝可以使用，孕妈们当然也是可以的。

(3)大名鼎鼎的AVEENO燕麦润肤乳：大家一定记得要选择这个不含香料“FRAGRANCE FREE”的，孕妈们使用起来更安全。这个用来做身体的润肤非常好，洗完澡后顺便抹上就可以了~~

(4) Weleda 维蕾德有机海盐防蛀牙膏：主要成分为黑刺李汁，没药萃取，七叶树萃取，荷荷芭油，海盐等，不含氟等成分，因此也被淘宝上一些卖家称为“孕妇牙膏”。其中的海盐成分，在清洁之余还具有磨砂作用，令牙齿亮白；不含氟、清洁剂、合成香料和色素、防腐剂以及石油衍生物，使用更安全有效，孕妇也可以使用。

(5) Aubrey organics 奥泊丽有机天然GPB蛋白平衡洗发水 , 主要配方有有机芦荟、有机橙汁、椰子玉米油皂、有机荷荷芭油等，含氨基酸营养，以蛋白质为基础的糖原蛋白为干枯头发补充水分，增强头发纤维，促进头皮细胞健康生长，修复受损发质，重现柔软，直顺，光滑的头发，是Aubrey持久畅销产品之一，也是天然品牌销量第一的洗发水，尤其适合怀孕的准妈妈们洗护。纯有机物质.安全无害。适合各种发质。

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