质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/14 11:26:14

质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者
质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?
我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者蛋白质吧?
提到比值不好的质粒该怎么处理呢?

质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者
A260/A280比值2.2,一次1.6,这样去做转染,效率可能会低一些.
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度,你指的是A260的换算吧,如果有RNA及蛋白的影响,它们在260都有光吸收,因此这个值不准的.
提到比值不好的质粒,你是用试剂盒还是手提的?手提的话,蛋白高再用氯仿抽提一次,RNA多加点RNA酶,再用氯仿抽提一次,或者电泳切胶回收.

这个比例标明的是溶液中核酸的纯度,包括DNA, RNA,质粒,
如果太低的化,表明其中蛋白质杂质过多,一般是在1.8到1.95之间,应该是不会超过1.95,1.6说明蛋白质杂质过多

A260/A280比值2.2,一次1.6,这样去做转染,效率可能会低一些。
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度,你指的是A260的换算吧,?如果有RNA及蛋白的影响,它们在260都有光吸收,因此这个值不准的。

1)A260/A280 大于1.8 说明你样品中RNA含量太高,质粒不纯,但理论上应该不至于影响转染效率,因为RNA会很快被降解(如果你不刻意采取RNA保护手段的话);A260/A280 小于1.8,说明蛋白质含量高或试剂苯酚未除干净(蛋白和苯酚在280nm均有吸收峰),会降低转染效率,因为你质粒DNA浓度不够。
2)用UV检测样品,只是对“质粒浓度”的估计,A260/A280比值只是个经...

全部展开

1)A260/A280 大于1.8 说明你样品中RNA含量太高,质粒不纯,但理论上应该不至于影响转染效率,因为RNA会很快被降解(如果你不刻意采取RNA保护手段的话);A260/A280 小于1.8,说明蛋白质含量高或试剂苯酚未除干净(蛋白和苯酚在280nm均有吸收峰),会降低转染效率,因为你质粒DNA浓度不够。
2)用UV检测样品,只是对“质粒浓度”的估计,A260/A280比值只是个经验,而不能准确测定。反应的是样品中所有物质的吸光综合结果,不仅包括质粒、蛋白、RNA,好包括可能污染的试剂,等等。
3)如果A260/A280高于1.8 应该加入RNA酶降解RNA,再用苯酚去除RNA酶;如果该比值低于1.6,应该重新加入有机溶剂(氯仿苯酚异戊醇)去除可能存在的蛋白或者苯酚,进一步纯化DNA。

收起

质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者 鼠肝DNA提取实验中,最后测得A260/A280比值大于2,并且A260与A280的值都才零点零多,这是什么原因? 怎么测A260/A280 A260/A280=±1.某物质(DNA)在两波长260mn和280mn下比色,要求A260/A280比值在1.8附近,表达成A260/A280=±1.8, A260/A280=±1.8什么意思?某物质(DNA)在两波长260mn和280mn下比色,要求A260/A280比值在1.8附近,表达成A260/A280=±1.8,什么意思?对吗? 我用提取心脏RNA时,测得OD值A260和A280都很小,小于0.1, 1,碱变性法制备的质粒经紫外分光检测后发现A260|A280=1.53,请问该如何处理该质粒? 为什么测A260 / A280,他表示什么? 小弟做全血DNA提取和纯化实验不足一月,现在碰到如下问题,我跑了1%的胶 70v 跑胶结果,加样孔无亮点 无拖尾等现象但是用紫外分光光度计测A260=-0.073 A280=-0.04 两者比值为1.845 Conc(浓度)=-3.6520 核酸蛋白测定仪6132,A260和A280都能测定出来,但是A260/280不显示,显示的是-----,是为什么,要怎么调.是不是因为用太多次或者测的太频繁了. TRIzol法提取动物组织总RNA,A260/280>2是为什么?A260/2802是什么问题呢? 为什么提取dna紫外光谱鉴定时A260/A280大于2最后RNA酶的加入是老师负责完成的.我知道是因为有RNA污染,但是我看了所有人的数据,凡是DNA浓度大于1000的,A260/A280全部大于或等于2,是不是和RNA酶不 RNA电泳跑胶为什么没有5S条带组织RNA抽提,A260和A280的比值尚可,在1.83左右,但跑胶时却发现没有5S条带,我跑的是1%琼脂糖电泳胶 提取的总RNA的A260/230为1.5以内,对逆转录的影响大么 分光光度计测完A260再测A280时,是否要再次调零,为什么? 使用天根质粒提取试剂盒 浓度太低 260/230只有1.7 怎么回事呢.菌液没有去除干净会怎样? 分子测序,质粒提取pcr对孩子好吗? 怎样设计实验来研究质粒DNA提取的影响因素对其提取的影响?