质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/14 11:26:14
质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者
质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?
我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者蛋白质吧?
提到比值不好的质粒该怎么处理呢?
质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者
A260/A280比值2.2,一次1.6,这样去做转染,效率可能会低一些.
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度,你指的是A260的换算吧,如果有RNA及蛋白的影响,它们在260都有光吸收,因此这个值不准的.
提到比值不好的质粒,你是用试剂盒还是手提的?手提的话,蛋白高再用氯仿抽提一次,RNA多加点RNA酶,再用氯仿抽提一次,或者电泳切胶回收.
这个比例标明的是溶液中核酸的纯度,包括DNA, RNA,质粒,
如果太低的化,表明其中蛋白质杂质过多,一般是在1.8到1.95之间,应该是不会超过1.95,1.6说明蛋白质杂质过多
A260/A280比值2.2,一次1.6,这样去做转染,效率可能会低一些。
用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度,你指的是A260的换算吧,?如果有RNA及蛋白的影响,它们在260都有光吸收,因此这个值不准的。
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1)A260/A280 大于1.8 说明你样品中RNA含量太高,质粒不纯,但理论上应该不至于影响转染效率,因为RNA会很快被降解(如果你不刻意采取RNA保护手段的话);A260/A280 小于1.8,说明蛋白质含量高或试剂苯酚未除干净(蛋白和苯酚在280nm均有吸收峰),会降低转染效率,因为你质粒DNA浓度不够。
2)用UV检测样品,只是对“质粒浓度”的估计,A260/A280比值只是个经...
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1)A260/A280 大于1.8 说明你样品中RNA含量太高,质粒不纯,但理论上应该不至于影响转染效率,因为RNA会很快被降解(如果你不刻意采取RNA保护手段的话);A260/A280 小于1.8,说明蛋白质含量高或试剂苯酚未除干净(蛋白和苯酚在280nm均有吸收峰),会降低转染效率,因为你质粒DNA浓度不够。
2)用UV检测样品,只是对“质粒浓度”的估计,A260/A280比值只是个经验,而不能准确测定。反应的是样品中所有物质的吸光综合结果,不仅包括质粒、蛋白、RNA,好包括可能污染的试剂,等等。
3)如果A260/A280高于1.8 应该加入RNA酶降解RNA,再用苯酚去除RNA酶;如果该比值低于1.6,应该重新加入有机溶剂(氯仿苯酚异戊醇)去除可能存在的蛋白或者苯酚,进一步纯化DNA。
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