什么情况下做降落PCR

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 15:33:29

什么情况下做降落PCR
什么情况下做降落PCR

什么情况下做降落PCR
该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程.正确和非正确退火温度之间的任何差异将造成每个循环PCR产物量的两倍差异(每摄氏度造成4倍差异).因此相对于非正确产物,正确的产物可以得到富集.该方法的另一个应用是在确定已知序列肽的DNA序列.
说白了就是当你不知道Tm值的时候,又不想很麻烦的找出最佳Tm值时候,做这个.适用于经常更换引物的实验.

引物Tm值较高 要求的退火温度就高 这时候使用降落PCR(touchdown PCR)增高引物与模板的结合概率 特异性也就会增强