可以直接用龙胆紫或醋酸洋红染DNA吗?如果不行会有什么后果?把大肠杆菌染成红色的是什么?三个问
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 05:57:31
可以直接用龙胆紫或醋酸洋红染DNA吗?如果不行会有什么后果?把大肠杆菌染成红色的是什么?三个问
可以直接用龙胆紫或醋酸洋红染DNA吗?如果不行会有什么后果?把大肠杆菌染成红色的是什么?三个问
可以直接用龙胆紫或醋酸洋红染DNA吗?如果不行会有什么后果?把大肠杆菌染成红色的是什么?三个问
1.龙胆紫或醋酸洋红是染染色质的,不是直接染DNA,DNA染色或鉴定用的是下面试剂:
甲基绿:检测DNA在细胞中分布,遇到DNA出现绿色.一般和呲罗红(使细胞质
呈现红色便于区分)一起加.
二苯胺:检测DNA的存在,DNA遇到二苯胺,水浴加热出现蓝色.(一般用于DNA
分离与提纯实验.)
2.没什么后果,就是会让细胞核(染色质集中)染上颜色(紫色或红色)
3.把大肠杆菌染成红色的是革兰氏染色法:
大肠杆菌革兰氏阴性和金黄色葡萄球菌格兰氏阳
所以别的菌的染色都可以拿它们作对照
革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立.
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—).为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染.阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色.有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应.
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样.现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据.另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反.所以染色时的条件要严格控制.例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应.此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色.所以脱色时间,脱色方法也应严格控制.
革兰氏染色原理:
G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色.