目的基因与标记基因目的基因一定和标记基因同时表达吗?会不会目的基因成功表达而标记基因未得到表达,那成功转化的细胞岂不是被杀死.
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 05:40:32
目的基因与标记基因目的基因一定和标记基因同时表达吗?会不会目的基因成功表达而标记基因未得到表达,那成功转化的细胞岂不是被杀死.
目的基因与标记基因
目的基因一定和标记基因同时表达吗?会不会目的基因成功表达而标记基因未得到表达,那成功转化的细胞岂不是被杀死.
目的基因与标记基因目的基因一定和标记基因同时表达吗?会不会目的基因成功表达而标记基因未得到表达,那成功转化的细胞岂不是被杀死.
这只能说是一种概率问题而已
一般来说目的基因和标记基因都是被“捆绑”起来的
但是他们互相脱落的概率是1%
那么一般来说只要标记基因表达出来了 那么目的基因就也是已经进入质粒里面了
还有就是你下面那个问题
一般这个筛选基因只是第一步骤 会有很多这样的细胞的 杀死一两个也是没什么大碍的
而如果没有筛选出来再直接进入下一谢列步骤 会造成对时间和金钱的浪费的
目的基因的成功表达一般要经过前3步检测。
1、检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因
2、检测目的基因是否转录出mRNA
3、检测目的基因是否翻译出相应蛋白质
4、个体水平检测是否表现出相应性状
而标记基因能否表达性状只是第一步,标记基因的表达只能说明含标记基因的片段已进入生物体...
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目的基因的成功表达一般要经过前3步检测。
1、检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因
2、检测目的基因是否转录出mRNA
3、检测目的基因是否翻译出相应蛋白质
4、个体水平检测是否表现出相应性状
而标记基因能否表达性状只是第一步,标记基因的表达只能说明含标记基因的片段已进入生物体
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当然不是。培养基中加入了抗生素,不表达抗性的克隆就不能生长。
目的基因和标记(抗药)基因处于同一个质粒上。一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动。抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增。而目的基因则根据情况而定。如果只是用来扩增,而不需要在细菌中表达(比如启动子是哺乳动物的),那目的基因就不会表达,而要转染到动物或人的细胞内才会表达。而如果是要用细菌来表达目的基因,则会采用细菌的启动子,这是抗药基因和目的基因同时表达。
请参...
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目的基因和标记(抗药)基因处于同一个质粒上。一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动。抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增。而目的基因则根据情况而定。如果只是用来扩增,而不需要在细菌中表达(比如启动子是哺乳动物的),那目的基因就不会表达,而要转染到动物或人的细胞内才会表达。而如果是要用细菌来表达目的基因,则会采用细菌的启动子,这是抗药基因和目的基因同时表达。
请参阅我对类似问题的回答,
http://zhidao.baidu.com/question/224314648.html
以上是针对细菌的。对哺乳动物的细胞,稳定转染需要带有目的基因和抗481基因(neo)的质粒和染色体发生重组。由于质粒的大小相对于染色体很小,大多数情况下这2个基因不会分开。你说的情况发生于只有目的基因发生重组和抗药基因没有重组的情况。这样,即使细胞成功重组了目的基因,但是由于丢失了抗药基因,在筛选的过程中就会被481杀死。不过由于比例很小,可以忽略不计。
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