关于clontech的smart race试剂盒拉5‘端的问题我用smart race试剂盒拉出了一段250bp左右的5‘端片段,这就是该基因的5‘端序列吗?我看别人在同一基因里面拉出的5’端起码有500bp,这就是为什么呢?如

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 03:33:17

关于clontech的smart race试剂盒拉5‘端的问题我用smart race试剂盒拉出了一段250bp左右的5‘端片段,这就是该基因的5‘端序列吗?我看别人在同一基因里面拉出的5’端起码有500bp,这就是为什么呢?如
关于clontech的smart race试剂盒拉5‘端的问题
我用smart race试剂盒拉出了一段250bp左右的5‘端片段,这就是该基因的5‘端序列吗?我看别人在同一基因里面拉出的5’端起码有500bp,这就是为什么呢?如果我重新做一次的话,能否拉出较长的片段?

关于clontech的smart race试剂盒拉5‘端的问题我用smart race试剂盒拉出了一段250bp左右的5‘端片段,这就是该基因的5‘端序列吗?我看别人在同一基因里面拉出的5’端起码有500bp,这就是为什么呢?如
在做RACE之前,应该将你现有的序列在NCBI等网站数据库中进行Blast同源相似分析,大概确定你的这段序列的5‘端在整个全长基因中的位置,这样就能大概确定你的PCR产物是不是5’端了.
我做的时候全长基因有2000多bp,Blast时手上的基因序列5’端离全长基因5‘端好远,大概有1600bp,这说明我这段序列是靠近3’端的,根据1600bp这个对比后的大小,就可以在PCR之后的电泳条带上初步确定是否是5‘端了.