PCR产物酶切遇到的问题选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG 39 75 C C/AGG…… C C/TGG……pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 18:07:14
PCR产物酶切遇到的问题选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG 39 75 C C/AGG…… C C/TGG……pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不
PCR产物酶切遇到的问题
选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG
39 75
C C/AGG…… C C/TGG……
pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图
较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不开怎么办啊
上边的不是引物而据一,在另一个胶上跑了pcr产物和酶切产物,pcr产物的引物二聚体与这个条带不同。
左边那个条带是另一个试验的产物,不需要考虑。
PCR产物酶切遇到的问题选择的内切酶 酶切位点是CC/WGG 39 75 C C/AGG…… C C/TGG……pcr产物 544 切割后出现40bp 36bp 468bp 酶切后如下图较短酶切着产物看不清,而且电泳区分不
能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性梯度聚丙烯酰胺胶,甚至能分辨只相差一个碱基的核酸.
所以如果你一定要分清40和36bp的带,就用聚丙烯酰胺试试.
你这是干吗用?需要进一步的胶回收、连接、转化吗?
如果就是为了看看电泳结果。有两个办法:
第一,我看你用的应该是琼脂糖电泳。加大琼脂糖浓度
第二,该店用,使用PAGE,大板连几个bp都能区分开,非常漂亮