什么是菌落pcr假阳性

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 22:32:06

什么是菌落pcr假阳性
什么是菌落pcr假阳性

什么是菌落pcr假阳性
利用菌落作为模板进行PCR扩增,验证该菌落里是否带有目标片段.但是由于PCR是一个级联放大的过程,所以即使菌落中不含有目标片段,而是菌落表面沾有一部分之前连接,转化中用的目标DNA,也会导致PCR获得扩增条带,从而误认为这个菌落已经带有了目标片段,称之为假阳性.
可以通过提质粒酶切,或者测序验证,排除假阳性的可能.

什么是菌落pcr假阳性 菌落PCR怎么做有人用菌落做过PCR吗,假阳性高吗,效果怎么样啊 菌落pcr假阳性最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因 革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带. 菌落PCR原理 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 重组质粒转化大肠杆菌,几乎全是假阳性.挑了26个菌做菌落PCR只有3个阳性克隆.为什么假阳性那么多呢?会不会是感受态在-70度放得时间长了,不好用了.还是没有酶切好?用的是BamH I和Hind Ⅲ限制 菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了? 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? 什么是菌落? 什么是菌落? 菌落PCR和普通PCR区别 菌落PCR的具体操作方法 分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢? 您好!我想请问一下,如果使用菌落PCR的话,革兰氏阳性细菌会不会因为细胞壁很厚而P不出来呀? 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 关于菌落pcr我的做法是: 用枪头挑选单菌落到装有10uL水的pcr管中,然后悬浮菌液. 在做 PCR 时,吸取 2uL 做摸板,但电泳检测后,选有阳性克隆相对的菌液 8uL 与试管的液体培养基中培养.这样做, 什么是PCR