载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 07:45:51

载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料
载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料

载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料
我汗 你这没个师兄师姐啥的么
质粒你自己买或者找别的实验室要去.
目的基因的引物设计用primer premier5
酶切位点和保护碱基自己去查
首先用PCR从cDNA里面把你的目的基因扩增出来 然后跑琼脂糖胶回收 然后做酶切 切多久根据酶不同 把质粒载体也用相同的酶做酶切 然后两个都跑胶回收 然后用T4 DNA连接酶进行16度过夜连接 然后做转化 先把连接产物加到感受态的菌里面 冰上放30分钟 然后42度90秒 再冰上2分钟 然后涂板

载体构建最后到转化的详细步骤,以及所需要各种材料 设计一个实验流程,把下面的目标基因重组转化到大肠杆菌中进行表达要求包括:质粒DNA抽提,限制性内切酶酶切,目的DNA片段分离、纯化,载体构建,重组DNA转化等主要步骤 基因表达载体构建步骤 真核重组质粒构建需要pMD18T载体么?我现在构建真核重组质粒,是合成引物,pcr出目的片段,目的片段的双酶切胶回收、pEGFP-C1质粒的双酶切胶回收,T4连接酶连接,转化,送去测序.想问下这步骤对么? 基因表达载体的构建所需的条件 构建表达型载体所需的元件是什么? 关于植物油体蛋白表达纯化体系请详细介绍利用植物油体构建转化载体和基因表达的过程~谢谢! 将目的基因导入大肠杆菌需要先在体外构建基因表达载体?用Ca2+处理转化的方法和这个方法是并列关系? 如何做海绵蛋糕?所需要的原料,配料等分别有哪些?以及详细的步骤? 基因表达载体的构建 载体构建的过程rt. 基因表达载体构建的原理和操作步骤转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗? 什么是超表达载体?构建超表达载体的目的是什么?(详细一点)怎么用softberry预测基因? 构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和已经预先双酶切的目的载体连接,那么?先前的目的基因为什么不直接和目的载体相连呢?为什 在构建基因表达载体的时候什么时候需要人为地在上面加上启动子? 基因疫苗质粒载体的构建 鲫鱼的荧光素酶的大小?还有鲫鱼荧光素酶融合载体的构建步骤. 共转染是将两个基因构建到一个载体上,再转染的意思吗,还是两个基因构建到两个载体,再将两个载体转染?但是质粒不相容啊,可以转两个质粒到同一细胞吗?