不用PCR 如何获得目的基因
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/17 04:47:50
不用PCR 如何获得目的基因
不用PCR 如何获得目的基因
不用PCR 如何获得目的基因
获得目的基因书上介绍三种方法:从基因文库获取 利用PCR扩增 人工合成
PCR体系没有细胞内环境 PCR技术主要有3个过程变性:加热至90 95℃双链DNA解链成为单链DNA 退火:冷却至55 60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补
目的基因的获取方法:基因文库中提取,PCR技术,DNA合成仪直接人工合成
1.基因重组技术 要从供体细胞内分离出相应的DNA片段,其中要用要限制性核酸内切酶。它的确是识别特定的剪辑序列,但是不能保证你所截的基因片段就是有你所要的目的基因的(而且也有可能把你要的目的基因“剪”了),所以限制性内切酶的种类是要通过不断的实验来确定的(限制性内切酶的种类是很多的),也就是说这里面涉及到一个实际操...
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目的基因的获取方法:基因文库中提取,PCR技术,DNA合成仪直接人工合成
1.基因重组技术 要从供体细胞内分离出相应的DNA片段,其中要用要限制性核酸内切酶。它的确是识别特定的剪辑序列,但是不能保证你所截的基因片段就是有你所要的目的基因的(而且也有可能把你要的目的基因“剪”了),所以限制性内切酶的种类是要通过不断的实验来确定的(限制性内切酶的种类是很多的),也就是说这里面涉及到一个实际操作的问题。
2.PCR方法,很熟悉的方法了。
3. 人工合成 从基因库中得到所要的基因的序列,经过转录 翻译等过程得到所要的大量目的基因
相比之下当然用 从基因文库中提取目的基因 这中方法简单咯。
收起
1,分离mRNA,反转录出相应cDNA.
2,分离细胞DNA,用1进行显色杂交。
直接从来源细胞中分离、从基因文库或者cDNA文库获取、人工合成
基因文库或cDNA文库中寻找,或人工合成