PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R：size：29 TM67 %GC:55根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/17 20:37:07

PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R：size：29 TM67 %GC:55根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有
PCR扩增退火温度确定
引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55
引物R：size：29 TM67 %GC:55
根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?
本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?
我知道有软件可以计算，我只是想搞搞清楚根据上面的公式怎么算？还有从哪里得知G+C及A+T的含量？是订单上给的%GC就是G+C的值吗?还有A+T的含量怎么计算？

PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R：size：29 TM67 %GC:55根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有
计算退火温度的方法：
1. 退火温度＝4×（G＋C）＋2×（A＋T）－（5～8） 只是粗算,有时不灵,但比较简便.
2.用primer5（or oligo6）计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好.
3.合成引物的单子上也有个Tm,减去5～8也可,但有些公司提供的Tm就是方法1计算的.

1、软件预算
2、利用梯度PCR优化退火温度

PCR扩增退火温度确定引物F:SIZE:20 TM56.9 %GC:55引物R：size：29 TM67 %GC:55根据TM=4*（G+C）+2(A+T)-5它的退火温度是多少?本人小菜鸟一枚,请教高手,主要是不懂从订单上怎么确定G+C及A+T的含量?我知道有 pcr退火温度怎么确定? pcr退火温度怎么确定 DNA检测时,pcr扩增的退火温度怎么确定?有几种方法,请详述之 在引物设计时,长度超过25bp时,其PCR退火温度怎么确定? pcr退火温度太高有什么缺点pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低? PCR基因扩增问题退火温度根据什么判断? 引物ITSR/F退火温度是多少?急 CTAB提取白粉菌DNA后PCR扩增电泳结果只出现了引物二聚体能说明退火温度合适吗,实验失败的原因会是什么呢 高中生物pcr扩增引物是什么 如何确定pcr反应中的退火温度和延长时间 如何确定PCR反应中的退火温度和延长时间? ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? PCR扩增中,降低退火温度、延长变性时间对反应有何影响 PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么? 关于细菌基因组PCR的问题向做过细菌PCR的请教：体系一般都是多少,退火温度呢我们做过退火温度有48度、43度、56度,引物是通用引物1492R和27F,模板和引物都没问题,是不是引物和模板不匹配,10 PCR复性温度如何确定为什么要在最后延伸10min?是否有非特异性扩增产物（或引物二聚体），如何消除？