基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 23:04:42

基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始
什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的

基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
克隆基因的编码框时,必须从ATG开始或UTR处开始.当你想表达这个基因时,PCR产物必须包括完整的读码框;当你需要该基因融合GFP时,不仅需要从ATG开始,终止密码子必须突变掉,而且目的基因与GFP必须在一个读码框中.
而需要监测目的基因的表达水平时,如果使用RT-PCR,则最好是从基因的中上段开始设计引物,因为在RNA提取时,可能得到的部分RNA有小部分降解,或反转录时,只反转录了一部分,没有到ATG这端,因此,从中上有设计的引物更容易监测到目的基因的表达.

很多情况下载体是带有ATG和TAA的,自己序列里的信号肽不会影响表达后的功能!

因为如果是融合表达的载体,有起始密码子的,不需要ATG起始,而设计者认为前面一段对目的蛋白的功能不受影响,因此也就可以去除。您好!很感谢您的回答.我很同意一楼的说法"当你想表达这个基因时,PCR产物必须包括完整的读码框",之前我也是这种观念,因此对于做基因的克隆表达时,引物不是从目的基因的ATG开始的即PCR产物没有包括完整的读码框的很是疑惑不解,今天看到你的回答"设计者认为前面一段对目的蛋白的功...

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因为如果是融合表达的载体,有起始密码子的,不需要ATG起始,而设计者认为前面一段对目的蛋白的功能不受影响,因此也就可以去除。

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目的基因的表达必须从ATG开始,检测目的基因是否有表达的情况下,可以中间设计引物

基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的 PCR扩增后的目的基因如何提取分离?对阳性克隆中的目的基因又如何提取分离? 克隆载体在生物体内的表达蛋白的量小,为什么有的实验,还将含有目的基因的克隆载体,直接打入生物体内 含有目的基因的克隆载体打入生物体内,是如何表达蛋白的呢? 怎样克隆一个目的基因? 利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为克隆吗? 目的基因先克隆入克隆载体再亚克隆入表达载体与直接将目的基因克隆到表达载体上有什么好处? 高中生物:若将真核基因在原核细胞中表达,对该目的基因的基本要求是:“无内含子 为什么? 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素? 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素? 基因克隆的步骤 标记基因为什么能检测含有目的基因的细胞?没插入目的基因的同样也能表达标记基因啊?(标记基因在插入目的基因时又没被破坏,)所以这怎么检测啊? 目的基因是否表达的检测方法 基因表达载体在宿主细胞内复制算克隆吗 请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定. 请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定. 我如果目的是为了得到该基因的表达产物,而克隆基因,那么引物设计是否上游和下游分别在序列的两端啊?另外,序列是cdna序列还是cds序列? 如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?