引物加酶切位点以后还要分析吗?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/14 22:04:59

引物加酶切位点以后还要分析吗?
引物加酶切位点以后还要分析吗?

引物加酶切位点以后还要分析吗?
看样子你是要做克隆,给你说说我的经验吧,
带酶切位点的引物设计：保护碱基（4个）+酶切位点（6或8个）+与模板匹配序列（15-20个）.如果是一般的质粒做模板15个配对的绝对没问题,如果是比较复杂的模板,文库一类的,20-25个.
保证3‘端的5个碱基里有3个是G/C就行.我从来不用软件分析的.
PCR时,退火温度就是60度,25个循环.
你试试吧,肯定没问题的,我以前设计引物时也是很小心的,用软件分析半天,其实发现没有多大影响的.发卡结构,3’封闭,GC含量,TM值,影响也都不是这么大.
纯属经验,希望你的实验有好结果吧

可不可以详细一点？

不知道你想问什么问题就是我设好引物后加了双酶切位点，但是不知道是否需要在DNMAN或者Primer5.0上进行分析？在Primer5.0上进行酶切位点分析后发现发夹结构这儿有一个是红的，不知道这样子好不好扩增？这样子哦，你设计好的引物得分是多少（加了酶切位点）要是80分以上的话 可以试试，还有你的TM是多少度，这个温度最好是60以上 这样保险。 在Primer 当然可以分析了 这个分析只能是个参...

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不知道你想问什么问题

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引物加酶切位点以后还要分析吗? 有关PCR引物设计好像引物设计好以后,还要添加什么保护碱基,有时还要添加酶切位点,这些东西添加进去后,不是无法和模板链连接起来了吗?除非是把引物设计的所有要求统一起来,在模板链上 为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?如题.设计表达引物有什么要求吗? 扩CDS的引物能做基因的表达分析吗 语文总结要分析错因 还要写以后怎么做 考研数学还要考泛函分析吗? 分析了库伦力还要分析电场力吗? 新桥规出来以后,粗集料压碎值还要换算吗? PCR引物前面如何加酶切位点 PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果我删去三个就不配对了（只是下游引物）,影响 这是引物二聚体吗? 反转录需要引物吗 磷化以后为什么还要皂化, 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? 有关PCR技术问题引物是可以直接和单链DNA进行配对的吗?如果该单链DNA中（非3’端）可以和引物进行配对,那为什么引物还要从3’端开始?而不直接与中间的进行配对呢?而且为什么每次配对都 SPSS相关性不显著还要继续回归分析吗 SPSS相关性不显著还要继续回归分析吗 汉语结构分析 打完架以后 以后在这里是什么词?这句话是定中短语吗?还是?