为什么鉴定还原糖斐林试剂要甲液和乙液,还有蛋白质要双缩脲A、B液
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/29 02:43:42
为什么鉴定还原糖斐林试剂要甲液和乙液,还有蛋白质要双缩脲A、B液
为什么鉴定还原糖斐林试剂要甲液和乙液,还有蛋白质要双缩脲A、B液
为什么鉴定还原糖斐林试剂要甲液和乙液,还有蛋白质要双缩脲A、B液
首先要明白斐林试剂的原理;
斐林试剂为一定浓度的氢氧化钠和硫酸铜配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液,葡萄糖溶液在加入斐林试剂后,在加热条件下还原为砖红色的沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸.其反应式为:
CH2OH—(CHOHH)4—CHO + 2Cu(OH)2 → CH2OH—(CHOH)4—COOH + Cu2O + 2H2O
氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液就是A液和B液,两者混合反应成Cu(OH)2,所以必须两者都要用.
斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液(斐林试剂中还有酒石酸钾钠)和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:
(1)溶液浓度不同
CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05 g/mL;
CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01 g/mL。
(2)使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖...
全部展开
斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液(斐林试剂中还有酒石酸钾钠)和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:
(1)溶液浓度不同
CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05 g/mL;
CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01 g/mL。
(2)使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
(3)使用方法不同
斐林试剂使用时,先等体积混合甲、乙两液,而后立即使用,反应需要加热(有时不加热也反应);双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象。
收起