流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?您好我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,步骤是不是这样的：1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/11/06 08:09:32

流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?您好我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,步骤是不是这样的：1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形
流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?
您好
我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,
步骤是不是这样的：
1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形成单个细胞,加PBS,800g,.弃上清.再用PBS重新清洗2次.
2.调整细胞密度为1X10*6/ml,上机检测.以未转染的细胞作为阴性对照.

流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?您好我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,步骤是不是这样的：1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形
转染的质粒带有标记基因,比如EGFP.分析绿色细胞的比例就得到了转染效率了.

是可以这样做的

几点建议（按照你的步骤先后）：
1. PBS清洗后离心，800 x g 太大了，一般300-500就可以，太大细胞损伤严重。
2.只需要取一小部分细胞检测就好，不要把所有细胞都上机，以免污染。
3.阴性对照应该用转染了空质粒（无绿色荧光），而不是为转染的细胞。...

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几点建议（按照你的步骤先后）：
1. PBS清洗后离心，800 x g 太大了，一般300-500就可以，太大细胞损伤严重。
2.只需要取一小部分细胞检测就好，不要把所有细胞都上机，以免污染。
3.阴性对照应该用转染了空质粒（无绿色荧光），而不是为转染的细胞。

收起

流式细胞仪测细胞转染效率,需要做其他处理吗?您好我想用流式细胞仪检测转染细胞的效率,转染细胞会发绿色荧光,步骤是不是这样的：1.收集细胞:用胰酶(0.25%)消化转染的细胞,将细胞吹打形用流式细胞仪分析细胞转染效率的原理是什么思考题,在哺乳动物细胞转染实验中为提高转染效率需要注意哪些问题在哺乳动物细胞转染实验中为提高转染效率需要注意哪些问题在哺乳动物细胞转染实验中味提高转染效率需要注意哪些问题如何鉴定细胞的转染效率? 如何用流式细胞术测定细胞转染率? 用Lipo2000转染肌肉细胞为什么效率低下, 慢病毒转染系统和逆转录病毒转染系统在转染T细胞的过程中操作有什么不同?有什么注意事项啊?为什么我做的转染效率连5%都达不到? 想请教您关于流式的问题,用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转化效率,GFP验证工作效率用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转染效率,GFP验证核酸酶工作效率（即GFP本来不发光,只我想做siRNA转染后细胞生长曲线的变化,那么用lipo2000转染应该是稳定转染还是瞬时转染? 高中生物转染细胞方法什么是细胞转染质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗? 哪一家公司可以代做细胞转染实验? 做质粒转染293T细胞,提取质粒后用单酶切嘛?为啥是稳定转染，构建一个细胞系细胞转染我现在遇到了这个问题,我用的是化工学院合成的脂质体,按照不同的氮磷比转染A549细胞,开始做凝胶阻滞实验,看什么氮磷比能够包裹细胞,然后看这些氮磷比下的转染效率,我做的是24 siRNA转染细胞的方法