质粒DNA为何保存在TE缓冲液中
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/08 04:53:56
质粒DNA为何保存在TE缓冲液中
质粒DNA为何保存在TE缓冲液中
质粒DNA为何保存在TE缓冲液中
TE为含EDTA的Tris-HCl(PH 8.0)缓冲液:
其中比较关键的成分是EDTA,日常环境中不可避免的存在DNase,而DNase的活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活.镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端.
TE中含有的EDTA可以螯合金属离子,从而使DNase失活.
而Tris-HCl的作用主要是维持一定碱性PH值,有助于DNA的溶解和稳定.
一般长期保存需要TE缓冲液比较好,短期应用的可以使用ddH2O,有助于DNA连接等效果.
TE为Tris-HCl和EDTA的混合液,EDTA可以螯合金属离子和DNase,Tris-HCl可以维持一定的pH,以稳定DNA结构,将质粒保存于TE中可以比在ddH2O中药稳定得多,保存更长时间。
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