在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/04 04:00:15
在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
这个要看你是具体如何克隆的
如果你使用的是酶切连接,选择不同黏末端的酶一般不会发生自身环化
如果是平端连接,则需要对载体去磷,也就是碱性磷酸酶处理.此时需要注意你的插入片段两边要有磷酸基团(可以引物合成时添加,也可设计平端的酶如EcoRV自己回来切),否则是连不上的.
同上
有不同的限制酶切割
采用碱性磷酸酶,对酶切后的载体脱磷酸化处理就可以了
用不同的限制酶切割这样载体分子两端
在基因克隆中如何防止载体分子的自身环化作用
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