体外DNA复制需要什么条件
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 00:06:35
体外DNA复制需要什么条件
体外DNA复制需要什么条件
体外DNA复制需要什么条件
你是指PCR技术吧
反应需要的物质:需要模板(要扩增的DNA)、引物(RNA,前后引物)、底物(dNTP,即dATP,dTTP,dGTP,dCTP)、DNA聚合酶(耐热,常用的是Taq酶)、合适的缓冲液.
反应体系为:变性温度在90度以上,退火温度在52度左右,延伸温度在72度左右.
模板DNA,酶,合适的温度,酸碱度,游离的氨基酸
二楼正解
酶,模板,dNTP,引物,一台PCR仪
聚合酶链式反应,简称PCR。又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。 由美国科学家PE(Perkin Elmer珀金-埃尔默)公司遗传部的Dr. Mullis发明,由于PCR技术在理论和应用上的跨时代意义,因此Mullis获得了1993年化学诺贝尔奖。 是一种体外快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基...
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酶,模板,dNTP,引物,一台PCR仪
聚合酶链式反应,简称PCR。又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。 由美国科学家PE(Perkin Elmer珀金-埃尔默)公司遗传部的Dr. Mullis发明,由于PCR技术在理论和应用上的跨时代意义,因此Mullis获得了1993年化学诺贝尔奖。 是一种体外快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
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问的是pcr么?模版。引物。耐高温的解旋酶、dna聚合酶。各种游离脱氧核甘酸。缓冲液。