在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/31 06:28:19
在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活?
在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活?
在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活?
蛋白质在溶液中容易受到温度、蛋白酶、pH、盐类等的影响而失活.
① 温度:一般的蛋白都不耐高温,所以在提取及储存过程中应注意进行温度控制,一般过程样品等都应放置在4℃.
② 蛋白酶:为防止蛋白受到蛋白酶的作用降解失活,一般会加入如EDTA金属螯合剂,PMSF之类的蛋白酶抑制剂等,另低温也可以起到一定的抑制蛋白酶作用.
③ pH:应采用有足够缓冲容量的缓冲体系防止pH过度的变化,缓冲液pH范围根据蛋白稳定性来确定.尤其是加入大量盐类如盐析等时应特别注意.
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温度、pH值、提取物中混杂的蛋白酶确实是一个重要的考量,另外提取工艺也会影响到蛋白类药物的活性,例如分子筛分离、样品浓缩时,缓冲液离子强度、压强、流速等也可能影响蛋白活性;
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