作业帮台盼蓝 染色的操作方法,以及使用范围,优点
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/07 19:32:06
台盼蓝 染色的操作方法,以及使用范围,优点
台盼蓝 染色的操作方法,以及使用范围,优点
台盼蓝 染色的操作方法,以及使用范围,优点
基本性质
中英文名称：台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝
分子式：C34H24N6O14S4Na4
分子量: 960.82
可溶于水（10mg/ml)
是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性.还常用于细胞是否存活.活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色.
机理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反.因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞.台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一.注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象.
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量.
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单.
步骤
步骤：(来自supergama)
1、4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存.使用时.用PBS稀释至0.4%.（也可买Gibco的成品）; T$ d& \! h% l, E) Z) A- W
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释.
3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀.（终浓度0.04%）
4、计数：在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞. 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状.
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
其他
保存条件
室温保存
说明
有潜在致癌危险
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作.