菌液PCR原理是?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/26 20:07:39
菌液PCR原理是?
菌液PCR原理是?
菌液PCR原理是?
跟普通PCR原理是一样的,因为94度变形可以裂解细菌,释放出DNA,所以不用提质粒也可以PCR出来条带
加热使菌体裂解,使DNA释放出来。然后进行DNA的PCR。所以,严格来说,菌液PCR是细菌DNA的PCR。原理与DNA的PCR一样。先高温变性,使DNA解开双链,然后是中温退火,上游引物和下游引物分别与DNA单链的5‘及3’端结合,最后是延伸,即DNA开始复制为双链DNA。之后一直循环这个过程。设备齐全的话,直接把菌落加入菌液中,然后用机器设置。预变性时间要10~15分钟。然后可以进行DNA的PC...
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加热使菌体裂解,使DNA释放出来。然后进行DNA的PCR。所以,严格来说,菌液PCR是细菌DNA的PCR。原理与DNA的PCR一样。先高温变性,使DNA解开双链,然后是中温退火,上游引物和下游引物分别与DNA单链的5‘及3’端结合,最后是延伸,即DNA开始复制为双链DNA。之后一直循环这个过程。设备齐全的话,直接把菌落加入菌液中,然后用机器设置。预变性时间要10~15分钟。然后可以进行DNA的PCR。也是将时间调好,循环次数调好即可、
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其实就是分子克隆里的煮沸法提质粒DNA,因为PCR对模板要求低所以这种方法更方便快捷。
94度水都要沸啦,细菌受不了啦就挂掉啦,细胞壁和细胞膜破碎,释放出DNA来作为扩增的模板。