我做western从细胞中提目的蛋白,用RIPA裂解液提蛋白,请问裂解液和细胞加入的比例是多少?

我做western从细胞中提目的蛋白,用RIPA裂解液提蛋白,请问裂解液和细胞加入的比例是多少? 我做western时从细胞中提取我要的目的蛋白,用的是RIPA蛋白裂解液,裂解后样品特别粘稠,这样算裂解成功么 细胞蛋白如何提取?做western blot的 细胞蛋白如何提取 我要用western检测一种细胞系中分泌蛋白的表达,eg:细胞因子,是检测培养液中的蛋白还是细胞抽提物种的呢我个人觉得分泌蛋白是通过分泌到细胞外之后产生作用的,那就应该检测培养液中的蛋 我做western,蛋白180KD,请问用多大浓度的分离胶即浓缩胶? western blot 如何体外获得目的蛋白 用pcDNA3.1在哺乳动物细胞里表达蛋白,从转染开始算,多长时间可以表达出目的蛋白呢~ 蛋白纯化员具体要做什么 工作中试剂有毒么 希望具体一点 从大肠杆菌中蛋白的纯化从大肠杆菌中获得纯化目的蛋白 western blot如何定量测定细胞中某蛋白表达量? BCA蛋白定量法BSA及样品用什么稀释?我测得是组织蛋白浓度.我用的是百泰生的裂解液，后续做western 用western检测真核表达的带有flag标签的融合蛋白时,能用目的蛋白本身的抗体进行检测,但用flag抗体确无法在确保western条件没有问题的情况下，我在检测N端带有flag标签的融合蛋白时，用目的 做western蛋白浓度太小怎么办? 做western blot时上样量过高会导致类似于PCR的平台期而掩盖目的蛋白的趋势么?为什么? 要用ELISA试剂盒检测人白介素17受体（IL-17R）,用什么方法能让细胞中的受体蛋白更好的释放出来?IL-17受体主要是膜蛋白,有人说用做Western提膜蛋白的试剂盒就行,不知道用来做ELISA的和做Western western blot如何应用于目的蛋白的组织定位 如何从细胞、蛋白、基因水平检测T细胞受抗原刺激后分泌IFN-V情况,以评估T细胞功能?详细步骤用细胞内细胞因子染色,酶联免疫斑点法,western-blot、elisa、rt-pcr、northern-blot WESTERN中蛋白样品怎么提取 已用甲醛固定的组织,能否再提取蛋白做WESTERN,怎样做?