全血DNA的提取能不能更简便的方法?比如可以省去一些常规方法的步骤!
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/20 03:55:30
全血DNA的提取能不能更简便的方法?比如可以省去一些常规方法的步骤!
全血DNA的提取能不能更简便的方法?
比如可以省去一些常规方法的步骤!
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你可以使用全血DNA试剂盒,在我映像中有个SIMGEN的试剂盒可以无需事先分离去除红细胞
无需蛋白酶K消化步骤,适用于从全血中分离纯化最多达15 μg总DNA.·15分钟内即可完成血液总DNA的制备.
无须事先分离去除红细胞及蛋白酶K消化步骤.
可从新鲜或者是冷冻的全血、溶血的全血、唾液、 细胞悬浮液等标本中分离纯化总DNA.
核酸纯化柱可最大吸附15μg 总DNA.
起始样品体积:200 μl- 400 μl全血.
彻底清除血样中的PCR抑制物,可使用多至1/2反应体系体积的模板进行扩增.
所需仪器:可适合2 ml离心管使用的离心机.
原理:全血样品经裂解液溶解后,用沉淀液沉淀血红蛋白.柱纯化核酸技术过滤除去残留的血红蛋白,吸附在纯化柱上的总DNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤后,可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物.纯化柱上的总DNA可直接用BufferTE或水洗脱,并可立即用于各种分子生物学实验.
步骤:在400 μl全血中加入300 μl Buffer L1溶解全血释放DNA,再加入300μl Buffer L2沉淀血红蛋白,离心取上清加入纯化柱中,经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后,DNA即可被TE溶液洗脱下来.
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