DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/17 00:17:48
DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
因为技术达不到啊,如果技术上可行的话,完全可以在染色体水平上进行DNA测序;
主要难点在于DNA实在太长了,序列太多了;
因而人们要避开这一点,所以就想到了把DNA分解成片断来操作;
但是该怎么分解,毕竟单独把一条染色体分解成小的DNA片断也是不合适的,因为DNA含量太小,太难操作;因此,既要保证DNA片断小,又要保证一定的DNA片断浓度.
所以,派拉蒙公司发明了一种方法,即取得细胞样品后,提取细胞中的染色体DNA,利用基因枪等等方法把DNA打碎,这样就保证了DNA片断的小以及浓度的高.
然后把这些DNA片断连到载体上,而这些DNA片断连到载体上的部位的载体序列(拗口)是已知的,因此,人们可以测出与载体相连的DNA片断的边缘序列是什么,从而使这些不同的DNA片断可以连在一起;同时,DNA片断的内部序列可以在又一轮的打断、连到载体上后进行测序,直到完全测出.
直到最后,所有的序列都被测出.这是一项大工程,需要一个大数据库,
由大化小,又由小得大,妙啊.
所以说DNA测序克隆到载体上是为了解决大片断DNA难以直接测定的问题,毕竟一次测定的DNA序列长度是有限的.
就这些,
一个是纯化和扩大培养,一个就是为了获得想要的dna片段,弄清序列
DNA测序为什么要克隆到载体上去 而不直接测呢
关于原核表达基因测序问题原核表达基因克隆时,为什么非要先克隆到中间载体上测序,而不是直接到表达载体,拿表达载体测序呢?希望大侠们不吝赐教啊!
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