如何配置牛肉膏蛋白胨培养基来检测饮用水中的细菌数
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/02 16:41:58
如何配置牛肉膏蛋白胨培养基来检测饮用水中的细菌数
如何配置牛肉膏蛋白胨培养基来检测饮用水中的细菌数
如何配置牛肉膏蛋白胨培养基来检测饮用水中的细菌数
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛和最普通的细菌基础培养基,又称普通培养基.它含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供微生物生长繁殖之用.基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCI.其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCI提提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量的琼脂作为凝固剂.
由于这种培养基多用于培养细菌,因此要用稀酸或稀碱将其PH调至碱性,以利于细菌的生长繁殖.
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:
牛肉膏 3.0g
NaCI 5.og
蛋白胨 10.0g
水 1000ml
pH 7.7.6
三、\x05操作器材
(1)溶液与试剂 牛肉膏,蛋白胨,NaCI,琼脂,1mol/LNaOH,1mol/LHCI.
(2)仪器及其他用具 试管,锥形瓶,烧杯,量筒,玻璃棒培养基分装器,天平,高压蒸汽灭菌器,PH试纸,棉花,牛皮纸,麻绳,纱布等.
四、操作步骤
1、称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCI放入烧杯中.
2、融化
在上述烧杯中先加入少于所需要的水量,用玻璃棒搅匀.然后加热使其溶解.各试剂完全溶解后,补充水到所需的总体积.配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,最后补充所损失的水分.
3、调pH
用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6.反之,用1mol/LHCI进行调节.
4、分装和加塞
将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞.
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好.用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期.
6、灭菌
将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌.
7、搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷却至500C左右,将试管口端搁在玻璃棒上.斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长 1/3.
8、无菌检查
将灭菌培养基放入370C的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底.
取水样 梯度稀释 配置相同的培养基 进行取样计数培养, 恒温 24 数菌斑 再按比例计算
按蛋白胨1%,氯化钠0.5%,牛肉膏0.3%的比例配置,调PH值至7.2-7.6后,加2%琼脂,121℃灭菌20分钟。
牛肉膏 3.0g
NaCI 5.og
蛋白胨 10.0g
水 1000ml
pH 7.4~7.6