如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量?请各位前辈指教：想要通过检测EGFP的表达量知道与其融合表达的基因的表达情况.是否可以应用流式细胞仪完成?上流式细胞仪之前对细胞应该做什

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/11/15 09:34:11

如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量?请各位前辈指教：想要通过检测EGFP的表达量知道与其融合表达的基因的表达情况.是否可以应用流式细胞仪完成?上流式细胞仪之前对细胞应该做什
如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量?
请各位前辈指教：想要通过检测EGFP的表达量知道与其融合表达的基因的表达情况.是否可以应用流式细胞仪完成?上流式细胞仪之前对细胞应该做什么样的处理?

如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量?请各位前辈指教：想要通过检测EGFP的表达量知道与其融合表达的基因的表达情况.是否可以应用流式细胞仪完成?上流式细胞仪之前对细胞应该做什
可以.这个是流式细胞仪一个常见的应用.
上流式细胞仪以前,需注意的是
1.细胞打散到单细胞的悬液,没有聚团成块.如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用.
2.细胞悬液的浓度不能过高和过低.详请参考你的仪器说明建议值.我的经验每毫升一百万足足够了.少些读取慢些也没有大问题,一支样品少过十万的话,就很容易得不到足够的数据.太多则读取过快,准确性可能降低,更多更危险,可能造成仪器管道堵塞.
3.如果上机时间能保证,细胞直接打散均匀在PBS里面就可以上机了,除了贴壁细胞需要的胰酶处理按照普通传代步骤来做,之后洗一次,没有什么其他处理.如果细胞悬液制好后可能需要等待（超过半小时）,则用1-2%多聚甲醛或福尔马林溶液保存细胞.注意避光避免丢失荧光信号.这样保存放4度冰箱一两个礼拜之后也还是可以上机,误差不大.

把你的细胞消化成单细胞悬液，通过流式细胞仪检测荧光强度就可以了。
需要准备没有荧光的细胞作为对照。

如何应用流式细胞仪检测荧光蛋白的表达量?请各位前辈指教：想要通过检测EGFP的表达量知道与其融合表达的基因的表达情况.是否可以应用流式细胞仪完成?上流式细胞仪之前对细胞应该做什细胞免疫荧光检测蛋白表达,所用破膜的试剂除TritonX100外都有哪些? 如果某种蛋白在细胞中低表达,用流式细胞术能不能检测到?不需要定量,只需要能检测到!流式细胞仪检查蛋白表达的敏感度跟western blot比怎样? 荧光蛋白如何导入细胞如何检测蛋白磷酸化表达? GFP荧光细胞移植入动物体内后如何检测其表达?将经过gfp转染的细胞移植入动物体内后如何才能测定其表达情况. 如何用流式细胞仪检测GFP的表达如何检测基因或蛋白的表达水平? 绿色荧光蛋白和荧光素酶基因是基因工程中广泛使用的两个报告基因,哪个基因表达蛋白的检测更灵敏? 目的基因与绿色荧光蛋白融合表达,可以用绿色荧光蛋白的抗体检测目的基因的表达水平吗?目的基因与绿色荧光蛋白融合表达,可以在WB过程中用绿色荧光蛋白的抗体检测目的基因的表达水平流式细胞术是不是只能检测细胞表面蛋白流式细胞术是不是只能检测细胞表面蛋白?也就是说流式细胞术能不能检测到细胞内某些蛋白的含量? 请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么?请问流式细胞仪检测细胞凋亡是检测什么指标?如何判定细胞凋亡呢? 流式细胞术测细胞表面抗原步骤是表面抗原,我想用荧光标记的抗体通过检测细胞表面的荧光强度来说明表面抗原的多少荧光素酶报告基因与GFP区别?能定量检测表达蛋白的报告基因有哪些? 没有绿色荧光蛋白如何鉴定转染间充质细胞成功某转基因抗虫水稻培育流程毒蛋白基因在转基因抗虫水稻中的表达需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶这句话错在哪儿了可用带荧光标记的毒蛋白抗体检测毒蛋白基因是否在水稻细胞中表达对流式细胞仪-调节荧光补偿是不是把其他颜色荧光都调到零是最好的?我用Annexin V-FITC和PI双染检测细胞凋亡,结果细胞给药后,细胞团层45度角向上偏,是不是荧光补偿没有调好,但是我的荧光补偿