作业帮质粒构建的载体在基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提取宿主的基因组,是否包括质粒
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 10:53:26
质粒构建的载体在基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提取宿主的基因组,是否包括质粒
质粒构建的载体在基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提取宿主的基因组,是否包括质粒
质粒构建的载体在基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提取宿主的基因组,是否包括质粒
如何遗传?重组质粒,即基因载体.是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传（如线粒体、叶绿体等）.
如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质粒有抗性基因,可以通过抗性筛选而大致判断.最经典的质粒确认是质粒DNA提取（不含有宿主DNA的）之后进行电泳确认其大小（3条带）.还可以通过质粒上特殊序列的PCR扩增而确认.你说的提取宿主基因组一般方法所得DNA均包括质粒DNA在内可用于PCR扩增模板.
重组的克隆载体或表达载体转化到感受态细胞中后能自主复制。利用菌落PCR可以扩增出与目的片段相当的条带，说明目的片段已经成功插入载体，也可进行测序进一步验证。
我想你说构建的载体应该是表达载体：
有两种表达载体：包括原核表达载体和真核表达载体，分子检测的时候不同的表达载体检测方法也不一样
原核表达载体通过转化进入到宿主菌中，菌液PCR鉴定，阳性克隆提质粒酶切，切下目的条带，说明成功转入目的载体；
真核表达载体先转入农杆菌中，菌液PCR检测有目的条带，证明表达载体成功转入农杆菌中。下一步就是将含有表达载体的农...
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我想你说构建的载体应该是表达载体：
有两种表达载体：包括原核表达载体和真核表达载体，分子检测的时候不同的表达载体检测方法也不一样
原核表达载体通过转化进入到宿主菌中，菌液PCR鉴定，阳性克隆提质粒酶切，切下目的条带，说明成功转入目的载体；
真核表达载体先转入农杆菌中，菌液PCR检测有目的条带，证明表达载体成功转入农杆菌中。下一步就是将含有表达载体的农杆菌侵染植物，得到植株提基因组DNA，然后以基因组DNA为模板进行PCR，如果有目的条带，初步鉴定目的基因整合进入了植物基因组；接着进行Southern杂交进一步确定基因整合进入基因组。
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