请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀?另有加到一定浓度盐后得到很多上浮物是怎么回事?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/17 20:47:40

请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀?另有加到一定浓度盐后得到很多上浮物是怎么回事?
请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀?
另有加到一定浓度盐后得到很多上浮物是怎么回事?

请问各位朋友,用盐析法提取蛋白质为什么得不到沉淀?另有加到一定浓度盐后得到很多上浮物是怎么回事?
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溶液pH值越接近蛋白的等电点,蛋白质越溶液沉淀.
盐析法是在中药水提液中,加入无机盐至一定浓度,或达饱和状态,可使某些成分在水中溶解度降低,从而与水溶性大的杂质分离.常作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等.例如自黄藤中提取掌叶防己碱,自三颗针中提取小檗碱在生产上都是用氯化钠或硫酸铵盐析制备.有些成分如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大,在提取时,亦往往先在水提取液中加入一定量的食盐,再用有机溶剂提取.
盐析(salting out)
定义
盐析
向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐,以破坏蛋白质
的胶体性质,使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出的现
象称为盐析.
如利用盐析法结晶肌红蛋白.
分段盐析
由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时
所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液
的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分
离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractional salting
out).如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,饱和硫酸铵
则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质.
盐析中常用的中性盐
硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等,其中以硫酸铵最为常用.
盐析的原理:
破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质
发生沉淀
破坏了水化层
在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性
比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了
蛋白质的水化层.
破坏了电荷
由于盐是强电解质,解离作用强,盐的解离可
抑制蛋白质弱电解质的解离,使蛋白质带电荷减少.
盐析的优点与注意事项
优点
不会引起蛋白质变性,经透析去盐后,能得到
保持生物活性的纯化蛋白质.
注意事项
盐析的成败决定于溶液的pH值与离子强度,
溶液pH值越接近蛋白的等电点,蛋白质越溶液沉淀.
盐析的应用---分离蛋白质分子