提取组织RNA时,如何减少RNA的降解!

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 08:18:22

提取组织RNA时,如何减少RNA的降解!
提取组织RNA时,如何减少RNA的降解!

提取组织RNA时,如何减少RNA的降解!
1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用.当然这些耗材都有现成商业化的买.
2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活).
3:液氮研磨,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出的RNA尽快纯化,不要放太长时间.
4:去NDA时,DNA酶处理的时间要短,不超过30分钟.
5:尽量在低温的条件下操作.戴口罩,在冰上操作时注意不要有水碰到管口.自来水,人说话时的口气,唾沫都会污染RNA.

1. 迅速操作
2. 一次性用具
3. 防止RNA酶污染(尤其是手上)
4. 样本用RNALater浸泡

主要是令人头疼的RNase,皮肤、头发、唾液甚至是受可能触及的仪器开关、移液器、冰箱把手上等等...而且他耐受高温等极端条件,在最适条件下恢复活力
因此所有试剂、耗材如枪头、试管要经DEPC水处理,单独存放;
多换手套,实验中尽量少触碰其他东西;
最好戴口罩、发套、白大褂,尽量避免走动和交谈;
尽量单独一间屋子,或一个超净台内做RNA实验;
在RNA实验中可...

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主要是令人头疼的RNase,皮肤、头发、唾液甚至是受可能触及的仪器开关、移液器、冰箱把手上等等...而且他耐受高温等极端条件,在最适条件下恢复活力
因此所有试剂、耗材如枪头、试管要经DEPC水处理,单独存放;
多换手套,实验中尽量少触碰其他东西;
最好戴口罩、发套、白大褂,尽量避免走动和交谈;
尽量单独一间屋子,或一个超净台内做RNA实验;
在RNA实验中可采用一些,如各种RNase inhibitor、RNAlater等商品化的试剂在短时间内抑制RNase活性等。

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