抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/05 21:47:23
抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
分子克隆的过程中,TRANSFORMATION实验中成功摄入并且表达靶向质粒的细菌,由于靶向质粒中抗生素基因的存在,因此可以在添加有抗生素的培养基中存活.而未曾摄入表达靶向质粒的细菌本身缺乏抗生素基因,从而被杀死.
因此达到筛选受体细菌是否导入目的质粒的目标.
而进一步在TRANSFECTION的过程中,质粒与细胞结合,经过RECOMBINATION整入受体细胞的基因组内.而作为质粒一部分的抗生素基因也一并整入,当然这个抗生素基因通常不是TRANSFORMATION中的抗生素基因了,而是另外一个.暂且命名TRANSORMATION的是抗生素A,TRANSFECTION的是B.
因此基于同样的道理,在TRANSFECTION结束以后,受体细胞开始在含有抗生素B的培养基中筛选,不含抗生素的被筛选出,逐步凋亡浮出被洗涤掉,筛选维持2-3个星期之后,就得到了导入目的基因的受体细胞.
举例比如说通常用的质粒,一般带有抗抗生素基因A,一般是ampicillin resistence gene,用于TRANSFORMATION筛选,另外还携带有抗抗生素基因B,一般是neomycin resistence gene或者是ZEOMYCIN resistence gene,用于TRANSFECTION筛选.
那位同志说的太难了。我给你简单点解释吧:
你的字似乎打错了,应该是“抗抗生素基因”吧?
基因的导入是在试管中反应的,微观上不能直接“看到”基因是否导入。这就需要有一定的方法来检验一下。在基因上导入抗抗生素基因,并把导入该基因的细胞放在含有抗生素的培养基上培养,若抗抗生素基因导入,则抗抗生素基因表达,阻碍培养基上抗生素的作用,使细胞存活下来。则,能存活得细胞已导入目的基因。
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那位同志说的太难了。我给你简单点解释吧:
你的字似乎打错了,应该是“抗抗生素基因”吧?
基因的导入是在试管中反应的,微观上不能直接“看到”基因是否导入。这就需要有一定的方法来检验一下。在基因上导入抗抗生素基因,并把导入该基因的细胞放在含有抗生素的培养基上培养,若抗抗生素基因导入,则抗抗生素基因表达,阻碍培养基上抗生素的作用,使细胞存活下来。则,能存活得细胞已导入目的基因。
也许我说的是片面的,仅作参考。
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高中没学呀