TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项?本人刚开始做 做了两三次 都跑不出RNA条带 很是揪心 希望能解答下 的详细注意事项以及作的经验

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/09 00:44:10

TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项?本人刚开始做 做了两三次 都跑不出RNA条带 很是揪心 希望能解答下 的详细注意事项以及作的经验
TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项?
本人刚开始做 做了两三次 都跑不出RNA条带 很是揪心 希望能解答下 的详细注意事项以及作的经验

TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项?本人刚开始做 做了两三次 都跑不出RNA条带 很是揪心 希望能解答下 的详细注意事项以及作的经验
三、Trizol法提取法（这是提禽流感病毒的步骤,供参考）
Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.
1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀；
2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒；
3、取上层水相于一新的离心管,按每ml Trizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇,室温放置10分钟,12000g离心10分钟；
4、弃去上清液,按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇,混匀,4℃下7500g离心5分钟；
5、重复第4步；
6、小心弃去上清液,然后室温干燥5-10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度；
7、然后将RNA溶于水中,放置10分钟.
[注意]
1、整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作,低温可以避免脆弱的RNA被降解；
2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上,RNA沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周,-20℃保存一年.

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