菌落总数的计算?食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300 问平板菌落数应该是多少?如何算?比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml在比如1;100稀释度菌落数是34.4
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/28 05:13:39
菌落总数的计算?食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300 问平板菌落数应该是多少?如何算?比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml在比如1;100稀释度菌落数是34.4
菌落总数的计算?
食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300
问平板菌落数应该是多少?如何算?
比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml
在比如1;100稀释度菌落数是34.42 应该结果是多少 cfu/ml
菌落总数的计算?食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300 问平板菌落数应该是多少?如何算?比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml在比如1;100稀释度菌落数是34.4
CFU 是Colony Forming Units)的缩写,翻译成汉语是菌落形成单位,cfu/g(ml)指的是每g(ml)检样含有的菌落总数,具体指在普通琼脂培养基上在一定条件下,培养出的菌落总数.一般以1g或1ml食品上所含的细菌数报告,即以cfu/g(ml)表示.实际上培养出的只是在营养琼脂上生长、好氧性的嗜中温细菌的活菌数,不是所有菌数,但是它作为细菌总数已得到公认.
计算公式:
每克样品中的菌株数=(C/V)*M
C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V:涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)
M:稀释倍数
中华人民共和国国家标准 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 GB 4789.2-94 菌落总数测定 代替 GB 4789.2-84 Microbiological examination of food hygiene Detection of aerobic bacterial count ——————————————————————————————————————— 1 主题内容与适...
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中华人民共和国国家标准 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 GB 4789.2-94 菌落总数测定 代替 GB 4789.2-84 Microbiological examination of food hygiene Detection of aerobic bacterial count ——————————————————————————————————————— 1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于食品中菌落总数的测定。 2 术语菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 3 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 4 设备和材料 4.1 温箱:36±1℃。 4.2 冰箱:0~4℃。 4.3 恒温水浴:46±1℃。 4.4 天平。 4.5 电炉。 4.6 吸管。 4.7 广口瓶或三角瓶:容量为500mL。 4.8 玻璃珠:直径约5mm。 4.9 平皿:直径为90mm。 4.10 试管。 4.11 放大镜。 4.12 菌落计数器。 4.13 酒精灯。 4.14 均质器或乳钵。 4.15 试管架。 4.16 灭菌刀或剪子。 4.17 灭菌镊子。 5 培养基和试剂 5.1 营养琼脂培养基:按GB 4789.28中4.7规定。 5.2 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。 5.3 生理盐水。 5.4 75%乙醇。 6 检验程序菌落总数的检验程序如下。 ┌—————┐ │ 检 样 │ └—————┘ ↓ ┌—————————————┐ │ 做成几个适当倍数的稀释液 │ └—————————————┘ ↓ ┌——————————————┐ │ 选择2~3个适宜稀释度 │ │ 各以1mL分别加入灭菌平皿内 │ └——————————————┘ ↓ ┌—————————————┐ │ 每皿内加入适量营养琼脂 │ └—————————————┘ 36±1℃ ↓ 48±2h ┌—————┐ │ 菌落计数 │ └—————┘ ↓ ┌——————┐ │ 报 告 │ └——————┘ 7 操作步骤 7.1 检样稀释及培养 7.1.1 以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10 的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8 000~10 000r/min的速度处理1min, 做成1∶10的均匀稀释液。 7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1∶10 0的稀释液。 7.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次, 即换用1支1mL灭菌吸管。 7.1.4 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 7.1.5 稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。 7.1.6 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。 7.2 菌落计数方法做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 7.3 菌落计数的报告 7.3.1 平板菌落数的选择选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。 7.3.2 稀释度的选择 7.3.2.1 应选择平均菌落数在30~300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之(见表中例1)。 7.3.2.2 若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字(见表中例2及 3)。 7.3.2.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以释稀倍数报告之(见表中例4)。 7.3.2.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。 7.3.2.5 若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之(见表中例6)。 7.3.2.6 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,其中一部分大于300或小于30 时,则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。 7.3.3 菌落数的报告菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示(见表中“报告方式”栏)。稀释度选择及菌落数报告方式 ——┬—————————————┬——————┬————┬————————— │ 稀释液及菌落数 │ │菌落总数│ 报告方式例次├————┬————┬———┤两稀释液之比│个/g或mL│ 个/g或mL │ 10-1 │ 10-2 │ 10-3 │ │ │ ——┼————┼————┼———┼——————┼————┼————————— 1 │多不可计│ 164 │ 20 │ - │ 16 400 │16 000或1.6×10**4 2 │多不可计│ 295 │ 46 │ 1.6 │ 37 750 │3 8000或3.8×10**4 3 │多不可计│ 271 │ 60 │ 2.2 │ 27 100 │27 000或2.7×10**4 4 │多不可计│多不可计│ 313 │ - │ 313 000│31 000或3.1×10**5 5 │ 27 │ 11 │ 5 │ - │ 270 │270或2.7×10**2 6 │ 0 │ 0 │ 0 │ - │ <1×10│ <10 7 │多不可计│ 305 │ 12 │ - │ 30 500│31 000或3.1×10**4
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首先应该明确你所谓1:10稀释后平板培养时取了多少毫升稀释后的菌悬液?
举个例子,如果你取了稀释十倍(也就是1:10)的菌悬液1ml涂布平板后培养得到100个单菌落,那么你的样品中就应该含有1000cfu/ml
食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300 !
平板菌落数应该是2×103(10的3次)。
比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml
平板菌落数应该是1.6×103(10的3次)。
在比如1;100稀释度菌落数是34.42 ? 应该结果是多少 cfu/ml
平板菌...
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食品的样品稀释度分别是1;10和1;100 结果是200和300 !
平板菌落数应该是2×103(10的3次)。
比如我的1;10稀释度菌落数是156.96?应该结果是多少 cfu/ml
平板菌落数应该是1.6×103(10的3次)。
在比如1;100稀释度菌落数是34.42 ? 应该结果是多少 cfu/ml
平板菌落数应该是3.4×103(10的3次)。
根据GB 4789.2-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定
1 菌落计数
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
1.1 选取菌落数在 30 CFU~300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于 30 CFU 的 平板记录具体菌落数,大于 300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
1.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释 度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以 2,代表一个平板菌落数。
1.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
2 结果与报告
2.1 菌落总数的计算方法
2.1.1 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每 g(mL)样品中菌落总数结果。
2.1.2 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按公式(1)计算:
式中:
N——样品中菌落数
C——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;
n 1——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;
n 2——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;
d——稀释因子(第一稀释度)。
示例:
上述数据按7.2.2数字修约后,表示为25000或2.5×104。
2.1.3 若所有稀释度的平板上菌落数均大于 300 CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
2.1.4 若所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
2.1.5 若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于 1 乘以最低稀释倍数计算。
2.1.6 若所有稀释度的平板菌落数均不在 30 CFU~300 CFU 之间,其中一部分小于 30 CFU 或大于 300 CFU 时,则以最接近 30 CFU 或 300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
2.2 菌落总数的报告
2.2.1 菌落数小于 100 CFU 时,按"四舍五入"原则修约,以整数报告。
2.2.2 菌落数大于或等于 100 CFU 时,第 3 位数字采用"四舍五入"原则修约后,取前 2 位数字,后面用 0 代替位数;也可用 10 的指数形式来表示,按"四舍五入"原则修约后,采用两位有效数字。
2.2.3 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。
2.2.4 若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
2.2.5 称重取样以 CFU/g 为单位报告,体积取样以 CFU/mL 为单位报告。
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