SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.电泳胶
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 08:24:20
SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.电泳胶
SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.
电泳胶
SDS-PAGE中上层胶为什么用pH6.8下层胶用pH8.电泳胶
上层的浓缩胶用的是Tris-HCL缓冲液,PH6.8,HCL的解离度大,几乎全部成CL-,CL-在电场中移动最快.而电泳槽中含有甘氨酸,在PH6.8时只有少量解离,在电场中移动的最慢.蛋白质(被夹在中间)就在由快慢离子形成的电位梯度中被浓缩了.
下层的分离胶用的是Tris-甘氨酸缓冲液,PH8.8,在此PH下,甘氨酸解离度增大,泳动速度增加并超过了蛋白质,原先的电位梯度消失,大小形状不同的蛋白质在电场中分离.
因为二者的目的是不一样的,上层是一种浓缩胶,它是要把蛋白质浓缩。下层胶是分离胶,是要把蛋白质分离的。用途不一样当然会有不同的结果
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