为什么有非典

为什么有非典
为什么有非典

为什么有非典
非典是由什么原因引起的? （一）流行病学 经典冠状病毒感染主要发生在冬春季节,广泛分布于世界各地.该病毒包括三个群,第一、二群主要为哺乳动物冠状病毒,第三群主要包括禽类冠状病毒.人冠状病毒有两个血甭型（HCo-229E,HCoV-OC43）,是人呼吸道感染的重要病原,人类20%的普通感冒由冠状病毒引起.冠状病毒也是成人慢性气管炎急性加重的重要病因之一.基因组学研究结果表明,SARS-CoV的基因与已知三个群经典冠状病毒均不相同,第一群病毒血清可与SARS-CoV反应,而SARS患者血清却不能与已知的冠状病毒反应.因此,作为一种新的冠状病毒,SARS-CoV可被归为第四群. （二）形态结构 SARS-CoV属冠状病毒科冠状病毒属,为有包膜病毒,直径多为60-120nm,包膜上有放射状排列的花瓣样或纤毛状突起,长约20nm或更长,基底窄,形似王冠,与经典冠状病毒相似.病毒的形态发生过程较长而复杂,成熟病毒呈圆球形、椭圆形,成熟的和未成熟的病毒体在大小和形态上都有很大差异,可以出现很多古怪的形态,如肾形、鼓槌形、马蹄形、铃铛形等,很容易与细胞器混淆.在大小上,病毒颗粒从开始的400nm减小到成熟后期的60-120nm.在患者尸体解剖标本切片中也可见到形态多样的病毒颗粒. （三）生物学特性 病毒在细胞质内增殖,由RNA基因编码的多聚酶利用细胞材料进行RNA复制和蛋白合成,组装成新病毒并出芽分泌到细胞外.与以往发现的冠状病毒不同,利用Vero－E6或Vero（绿猴肾细胞）细胞很容易对SARS-CoV进行分离培养,病毒在37℃条件下生长良好,细胞感染24小时即可出现病变,可用空斑进行病毒滴定,早期分离株的培养滴度一般可达1×106pfu/ml左右.在RD（人横纹肌肿瘤细胞）、MDCK（狗肾细胞）、293（人胚肾细胞）、2BS（人胚肺细胞）等细胞系上也可以培养,但滴度较低. 室温24℃下病毒在尿液里至少可存活10天,在腹泻患者的痰液和粪便里能存活5天以上,在血液中可存活15天,在塑料、玻璃、马赛克、金属、布料、复印纸等多种物体表面均可存活2-3天. 病毒对温度敏感,随温度升高抵抗力下降,37℃可存活4天,56℃加热90分钟、75℃加热30分钟能够灭活病毒.紫外线照射60分钟可杀死病毒. 病毒对有机溶剂敏感,乙醚4℃条件下作用24小时可完全灭活病毒,75％乙醇作用5分钟可使病毒失去活力,含氯的消毒剂作用5分钟可以灭活病毒. （四）分子生物学特点 病毒基因组为单股正链RNA,由大约30000个核苷酸组成,与经典冠状病毒仅有约60％同源性,但基因组的组织动工与其他冠状病毒相似.基因组从 5'到3'端依次为：5’-多聚酶-S-E-M-N-3'.5'端有甲基化帽子结构,其后是72个核苷酸的引导序列.基因组RNA约2/3为开放新闻记者框架（ORF）1a/1b,编码RNA多聚酶（Rep）,该蛋白直接从基因组RNA翻译,形成多蛋白前体,后者进一步被病毒主要蛋白酶3CLpro切割,主要负责病毒的转录和复制.Rep的下游有4人ORF,分别编码S、E、M和N四种结构蛋白,它们从亚基因组mRNA中翻译,亚基因组mRNA以不连续转录的机制合成,其转录由转录调控序列（TRS）启始,后者的保守序列为AAACGAAC.基因组3'端有polyA尾. 病毒包膜为双层脂膜,外膜蛋白包括糖蛋白S、M和小衣壳E蛋白.M糖蛋白与其他冠状病毒糖蛋白不同,仅有短的氨基末端结构域暴露于病毒包膜的外面.长而弯曲的螺旋状核衣壳结构由单一分子的基因组RNA、多分子的碱性N蛋白以及M蛋白的羧基末端组成.病毒的模拟结构如图1所示.S蛋白负责细胞的黏附、膜融合及诱导中和抗体,相对分子质量大约150000-180000,包括胞外域、跨膜结构域以及短羧基末端的胞质结构域.在经典冠状病毒中,E蛋白和M蛋白可能组成最小的装配单位,E蛋白对病毒的组装发挥关键作用,M蛋白对于病毒核心的稳定发挥重要作用.与其他冠状病毒不同的是,在S和E之间（X1-274aa,X2-154aa）以及M和N（X3-63aa,X4－122aa,X5-84aa）之间有多于50个氨基酸的多肽潜在编码序列,M和N之间还有少于50个氨基酸的多肽潜在编码序列.同源性搜索结果表明,这些潜在多肽与任何其他蛋白都没有序列的相似性. 图1 SARS冠状病毒的结构示意图 目前,国内外科学家已经报道了多株SARS－CoV的全基因组序列,发现其变异程度不高,来自新加坡4株、加拿大1株、美国1株、我国香港2株、北京4株和广东1株共13个病毒株中发现了129处变异.根据其进化树,可以将目前的流行株分为2个基因组：一组包括我国北京4个毒株（BJ01－BJ04）、广州1株（GZ01）和香港中文大学测定的1个毒株（CUHK）,其他毒株属于另外一组.分析病毒的变异特征,有可能为追踪病毒来源提供线索. （五）免疫学特征 大多数情况下,SARS－CoV感染时,人体免疫系统能够激发体液免疫和细胞免疫反应并逐渐控制感染、清除病毒.有许多证据表明,SARS－CoV感染时,人体免疫系统能够激发体液免疫和细胞免疫反应并逐渐控制感染、清除病毒.有许多证据表明,SARS－CoV可以直接侵犯免疫系统,导致患者淋巴细胞、白细胞减少和外周淋巴组织的病理损伤.多数SARS患者外周血白细胞计数正常或降低,而CD3＋、CD4＋、CD8＋、T淋巴细胞较正常人明显降低,病情越重,T淋巴细胞计数下降越明显,SARS患者恢复后 ,T淋巴细胞的数量和功能逐渐恢复正常.SARS-CoV核酸一般在临床症状出现后5天可以从患者鼻咽抽取物中检出,第10天左右达到高峰,然后开始降低；21天,47%的患者鼻咽抽取物为阳性,67%粪便标本为阳性,21%尿液标本为阳性.N蛋白能诱发较强的免疫反应,因此可用于抗体检测.对抗体的检测表明,一般发病后1周,患者体内IgM开始产生,最多可持续3个月；7-10天左右IgG开始产生,随后逐渐升高,1具月左右抗体滴度达到高峰并全部阳转,至患者恢复后6个月仍持续高水平阳性.SARS是一种新发疾病,人群普遍易感,流行病学资料表明,SARS-CoV主要引起显性感染,尚缺少亚临床感染的证据.本次SARS流行后,并未在人群中形成免疫保护屏障,人群仍普遍易感,检测患者血清中SARS-VoV特异性抗体有助于临床诊断. SARS是一种新近由SARS-CoV引起的传染病,人们对其发病机制的了解还不清楚,所得到的一些线索主要来自SARS死亡病例的尸体解剖资料、超微结构研究、核酸水平的SARS-CoV检测和SARS患者的临床资料.认识的许多方面仍属推测,而且不可避免地还会受到治疗措施的影响. SARS-CoV由呼吸道进入人体,在呼吸道黏膜上皮内复制,进一步引起病毒血症.被病毒侵染的细胞包括气管支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞、肠道上皮细胞、肾脏远段曲管上皮和淋巴细胞.肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞受累可损伤呼吸膜血气屏障的完整性,同时伴有炎症性充血,引起浆液和纤维蛋白原的大量渗出,渗出的纤维蛋白原凝集成纤维素,进而与坏死的肺泡上皮碎屑共同形成透明膜. 机体对SARS-CoV感染的反应可表现为肺间质内有巨噬细胞和淋巴细胞渗出,激活的巨噬细胞和淋巴细胞可释放细胞因子和自由基,进一步增加肺泡毛细血管的通透性和诱发成纤维细胞增生.受损的肺泡上皮细胞脱落到肺泡腔内可形成脱屑性肺泡炎,且肺泡腔内含有多量的巨噬细胞.增生脱落的肺泡上皮细胞和巨噬细胞可形成巨细胞.就巨细胞表型来说,主要为肺泡上皮细胞源（AE1/AE3阳性）,少数为巨噬细胞源（CD68阳性）.巨细胞的形成可能与SARS-CoV侵染有关.因为体外实验证明,SARS-CoV感染可使Vero细胞融合形成合体细胞.肺脏的以上改变符合弥漫性肺泡损伤（diffuse alveolar damage,DAD)的渗出期变化.病变严重或恢复不良的患者随后出现DAD的增殖期和纤维细胞,并产生Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维.肠道上皮细胞和肾脏远段曲管上皮细胞被SARS-CoV侵染,一方面可解释部分临床患者的消化道症状,另一方面也可能在疾病的传播途径方面有一定意义. 由于DAD和弥漫性肺变致的血氧饱和度下降,以及血管内皮细胞损伤等因素所引起的弥温性血管内凝血,常常造成多器官功能衰竭而导致患者死亡. SARS患者末梢血淋巴细胞减少,特别是CD4+细胞数减少,而且有证据表明SARS-CoV直接感染淋巴细胞,可能与SARS-CoV的细胞毒性作用以及诱导细胞凋亡作用有关.kjqdSARS患者的体液免疫反应似乎正常,但从SARS患者恢复期血清有明显的治疗作用的角度看,SARS－CoV感染也会不同程度地影响体液免疫反应.SARS-CoV影响细胞免疫和体液免疫反应在SARS发生发展过程中起一定作用,至少意味着细胞免疫和体液免疫损伤的患者预后较差. 有关SARS活检和尸检的材料有限,故对其病理改变的认识还很有限.基于目前的尸检材料和少量支气管活检,SARS主要累及肺和免疫器官如脾和淋巴结.其他脏器如心、肝、肾、肾上腺、脑等也可见出现不同程度的损害. 肺：一般均明显膨隆,肿大,重量增加（图2）.除继发感染者外,胸膜一般尚较光滑,暗红色或暗灰褐色.胸腔可无或有少量积液.肺组织切面以均匀变者居多,可累及全肺各叶,似大叶性肺炎的肝样变期.色红褐或暗紫.继发感染者可有大小不等的脓肿形成.肺血管内可见血栓,部分病例可出现局部区域的肺梗死.在部分病例中可见肺门淋巴结肿大. 图2 SARS患者的肺标本,示全肺明显膨胀、实变 光镜观察：肺的病变通常比较弥温,几乎累及所有肺叶.主要表现为弥温性肺泡损伤的改变.依据病变时期的不同可有如下表现：病程10天左右的病例主要为肺水肿 （图3）、纤维素渗出、透明膜形成（图8）、肺泡腔内巨噬细胞积聚和增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞脱落到肺泡内所形成的脱屑性肺炎及灶性肺出血等病变.这不仅在尸检标本可见,而且在经纤维支气管镜肺活检材料中亦有相同的病变变化 （图4）.部分增生的肺泡上皮盯互融合,呈合体状多核巨细胞.在增生的肺泡上皮及渗出的单核细胞的胞质内可见病毒包涵体.随着病变的进展,在病程超过3周的病例常可见到肺泡内渗出物的机化、透明膜的机化 （图5）和肺泡间隔的纤维母细胞增生.二者不断融合,最终形成肺泡的闭塞和萎缩（图6）,导致全肺实变.仅部分病例出现明显的纤维增生,导致肺纤维化甚至硬化.肺内小血管常可见到纤维素性微血栓.以上病变在不同的患者可有很大的差异,即使在同一患者的肺内亦可见到不同时期的病变.部分病例,尤其是长期治疗的患者,常可见到散在的小叶性肺炎甚至大面积真菌感染,其中以曲霉菌感染最为常见.继发性感染可累及到胸膜,造成胸腔积液、胸膜粘连,甚至发生胸膜腔闭塞. 图2 SARS患者的早期肺改变：肺水肿,肺泡腔内充满富含纤维素的水肿液 图3 SARS患者肺改变：透明膜,示肺泡内大量透明膜形成 图4 患者男性,41岁,发热3天,2002年12月23日入院,2002年12月25日发展为呼吸困难,行纤维支气管镜肺活检1周后确诊,肺活检见肺泡上皮细胞脱落,少量出血（A）,肺泡透明膜形成（B）,纤维母细胞增长（C） 图5 SARS患者肺改变：肺泡内的透明膜出现机化 图7 SARS患者脾改变：白髓萎缩,淋巴细胞稀疏,红髓充血、出血 淋巴结（腹腔淋巴结及肺门淋巴结）：部分病例可见到淋巴结肿大.镜下几乎所有检查的淋巴结淋巴滤泡均有不同程度的萎缩或消失,淋巴细胞分布稀疏,数量减少 （图8）.血管及淋巴窦明显扩张充血,窦组织细胞明显增生.部分病你可见出血及坏死. 图8 SARS患者淋巴改变：淋巴滤泡萎缩,淋巴窦及血管扩张 其他器官的改变： 心：SARS患者心脏的肥大比较常见,一般表现为左右心均匀性增厚.心肌间质水肿较明显,间质可有散在淋巴细胞及单核细胞浸润.部分病例可见到心肌细胞空泡变性,灶性心肌炎改变或心肌小灶性坏死.严重的继发感染如真菌感染也可累及到心脏. 肝：多数病例可见肾小球明显充血,肾小管上皮细胞变性.部分病例明小球毛细血管内可见广泛的纤维素性血栓,部分病例可见髓质内小灶状坏死及淋巴细胞和单核细胞浸润.肾间质血管扩张充血.部分病例可见到因继发感染所致的小化脓灶,偶见血管炎. 肾上腺：部分病例可见肾上腺皮髓质灶性出血、坏死、淋巴细胞浸润、皮质束状带细胞空泡变性和/或类脂含量减少. 脑：脑组织可见不同程度的水肿,部分病例脑内可见到散在的神经元因性改变,严重者甚至可见脑组织坏死.部分神经纤维可出现脱髓鞘现象. 骨髓：多数患者造血组织中粒系及巨核细胞系统细胞数量相对减少,部分病例红系细胞呈小灶状增生. 胃肠道：胃、小肠和结肠各段黏膜下淋巴组织减少,淋巴细胞稀疏,间质水肿.部分病例胃可见表浅的糜烂或溃疡. 胰腺：间质血管充血,部分病例间质有轻度纤维组织增生和淋巴细胞浸润.外分泌腺萎缩,酶原颗粒减少,部分胰岛细胞变性. 胆囊：未见明显病变. 睾丸：部分病例生精细胞变性,生精现象减少.可见间质血管扩张、出血. 前列腺、子宫、卵巢及输卵管：未见明显病变. 除此之外,部分病例在肺、心、肝、肾、脑、肾上腺、横纹肌等可见到以小静脉为主的小血管炎病变.表现为血管壁及血管周围的水肿、血管内皮细胞肿胀和凋亡、血管壁纤维素样坏死、血管壁内及血管周围单核细胞和淋巴细胞浸润.