蛋白提取-癌细胞-怎么提取-已经试过N种方法了,但是都无济于事,癌细胞用作western杂交试验,可是用裂解液与RIPA的方法都没有用

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/17 16:24:06

蛋白提取-癌细胞-怎么提取-已经试过N种方法了,但是都无济于事,癌细胞用作western杂交试验,可是用裂解液与RIPA的方法都没有用
蛋白提取-癌细胞-怎么提取-已经试过N种方法了,但是都无济于事,
癌细胞用作western杂交试验,可是用裂解液与RIPA的方法都没有用

蛋白提取-癌细胞-怎么提取-已经试过N种方法了,但是都无济于事,癌细胞用作western杂交试验,可是用裂解液与RIPA的方法都没有用
同样方法,你用正常细胞提取没有问题吗? WB的参照能显出来?如果是WB没结果,问题不一定是蛋白的提取.
最好是癌细胞和正常细胞同时做,如果还有hela的话,也一起,多一个参照,看是不是操作上的问题.一般动作上细致程度会影响量的多少.也要确定细胞数不能差太远.
此外,最后加PBS或缓冲液溶蛋白时少加一点,又或者是在WB时加大上样量,看是不是量不够;或加长显影时间.
也可以在做完电泳后,做银染直接看看.这个上样量必须足